Análisis bacteriológico del agua
Enviado por 27042019 • 27 de Abril de 2019 • Documentos de Investigación • 621 Palabras (3 Páginas) • 201 Visitas
ANÁLISIS BACTERIOLÓGICO DEL AGUA
Agua como líquido indispensable para la vida, además de ser abundante sobre la Tierra. Materia fecal incluye bacterias, como enterobacterias. Dichos organismos patógenos, pueden usar agua como vehículo de diseminación.
Propiedades de un identificador bacteriológico ideal de contaminación:
- Aplicable a todo tipo de agua
- Presente cuando existan bacterias patógenas de origen fecal
- Densidad asociada con el grado de contaminación fecal
- Mayor tiempo de supervivencia en agua que organismos patógenos entéricos.
- Desaparecer rápidamente del agua
- Ausentes en aguas bacteriológicamente potables
- No debe ser dañino para hombre ni animales.
Objetivos:
- Realizar técnica de Número más probable (NMP) y cuenta total de bacterias mesofílicas.
- Valorar importancia del examen bacteriológico del agua, integrando conocimientos adquiridos en prácticas anteriores.
Metodología:
- Toma de muestra, haciendo diluciones 1/10, 1/100 y 1/1000.
- Transferir alícuota de 1 mL de cada dilución a cada de Petri.
- Vaciar medio de cultivo y gelificar.
Cuenta total de bacterias mesofílicas aerobias (coliformes totales).
- Prueba Presuntiva. De la muestra de agua, tomar 10 mL y agregar a tubos de caldo lactosado doble concentración. Tomar 1 mL de muestra y agregarlos a 3 tubos de caldo de [ ] sencilla. Tomar 0.1 mL de la muestra y agregar a 3 tubos restantes. Incubar a 37 ºC
- Confirmativa. Muestras positivas , transferir asada a medio bilis verde brillante. Rotular con dilución a la que pertenece. Incubar, y hacer cuenta total de aerobios mesofílicos.
- Completa. Lectura de tubos BVB al 2% y confrontar con tabla de NMP, dando resultados de número de bacterias por 100 mL. Seleccionar tubo positivo de BVB, tomar asada y resembrar en caja EMB, por estría cruzada. Incubar y sembrar en medios SIM, RM - VP.
RESULTADOS
Medio | Función | Número de colonias | |
Caldo lactosado | Medio para detección de coliformes, a partir de fermentación de lactosa. | 236 | |
Verde bilis brillante | Con peptona, aportando nutrientes necesarios para crecimiento. Inhibición de gram positivas / negativas, permitiendo desarrollo de coliformes, utilizando lactosa como fuente de energía, con producción de ácido y gas. | 9 tubos positivos, siendo : El número más probable (NMP) de organismos por 100 mL de muestra, > 1100. Límite inferior igual a 460, mientras que el superior de 4300 | |
BD EMB | Contiene colorantes de azul metileno y eosina Y, que inhiben crecimiento de gram positivas. Actúan como indicadores diferenciales en respuesta a la fermentación de lactosa, a partir de origen de colonias de color azulado - negro, o bien, metálicas. | A partir de cultivo, se hizo tinción de gram, correspondiendo a las negativas. Forma de la colonia: bacilos, siendo de color verde metálica. Elevación plana. | |
SIM (Indol) | Cultivo rico en triptófano. Agregar reactivo de Kovac, siendo que un resultado positivo mostrará anillo rojo sobre caldo, poniendo de manifiesto presencia de indol debido a la utilidad del triptófano como fuente de carbono. | Negativo, pues no hay formación de anillo. | |
Rojo de metilo (M) | Indicador de pH. Permite determinar formación de ácidos orgánicos a partir de fermentación de carbohidrato. Color rojo como positivo, donde microorganismo utiliza vía de ácidos mixtos. | Negativo, pues no hubo viraje. Sin embargo, se produjo motilidad celular | |
Citrato (C) | Determinar si un organismo crece en medios con citrato como fuente de carbono debido a presencia de enzima citrato permeasa, para ingresar al interior dicha molécula. También utiliza sales de amonio como fuente de nitrógeno hasta producir NH4OH, alcalinizando el medio [ viraje a color azul ]. | No hubo viraje de color, pues el medio siguió verdoso. No hay crecimiento. | |
Voges - Proskauer (Vi) | Producción de acetoína / acetil metil carbinol por descarboxilación de moléculas de ácido pirúvico. Productos intermediarios de fermentación butanodiólica. Identificación a partir de hidróxido de potasio. [ oxidación de acetoína a diacetilo, que reacciona con peptona del medio para dar color rojizo ]. | Positivo, pues hubo cambio de color a rojo - rosado. |
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