Biologia Celular

Práctica no.2: Acción digestiva de las enzimas de la saliva

Objetivos: determinar la presencia de carbohidratos en diferentes muestras y productos comerciales y analizar la función de la amilasa salivar.

Fundamento Teórico:

Carbohidratos: Son moléculas orgánicas compuestas por carbono, hidrógeno y oxígeno. Son solubles en agua y se clasifican de acuerdo a la cantidad de carbonos o por el grupo funcional aldehído. Son la forma biológica primaria de almacenamiento y consumo de energía. Otras biomoléculas energéticas son las (lípidos) grasas y, en menor medida, las proteínas y los ácidos nucleicos.

Los glúcidos pueden sufrir reacciones de esterificación, aminación, reducción, oxidación, lo cual otorga a cada una de las estructuras una propiedad específica, como puede ser de solubilidad.

Amilasa Salival: La amilasa, denominada también ptialina o tialina, es un enzima hidrolasa que tiene la función de catalizar la reacción de hidrólisis de los enlaces 1-4 del componente α-Amilosa al digerir el glucógeno y el almidón para formar azúcares simples, se produce principalmente en las glándulas salivares (sobre todo en las glándulas parótidas) y en el páncreas. Tiene un pH de 7. Cuando una de estas glándulas se inflama aumenta la producción de amilasa y aparece elevado su nivel en sangre. Fue la primera enzima en ser identificada y aislada por Anselme Payen en 1833, quien la bautizó en un principio con el nombre de "diastasa".

Reactivo de Fehling: es una solución descubierta por el químico alemán Hermann von Fehling y que se utiliza como reactivo para la determinación de azúcares reductores.

Lugol: es un colorante con yodo que detecta específicamente

La presencia de almidón.

El líquido de Fehling (A y B) mezclado a partes iguales, nos indica la presencia de monosacáridos si cambia de color y pasa de azul a un color amarillo calabaza y, tras calentar, a rojo.

El lugol es un colorante con yodo que detecta específicamente la presencia de almidón

Recursos materiales (reactivos, equipo, muestras, animales):

1) Fehling A y Fehling B

2) Lugol

3) Gradilla

4) Tubos de ensayo

5) Harina

6) Jamón

7) Papa

8) Arroz

9) Almidón

10) Saliva

11) Estufa eléctrica

12) Vaso de precipitado

13) Termómetro

Procedimiento:

1. Agregar agua a 6 tubos de ensayo hasta 1/3 de su capacidad.

2. Rotular dos tubos con una S (S1 y S2), añade una pequeña cantidad de harina o almidón y agita para disolver (tapando la boca del tubo para evitar que se vierta el contenido). A continuación añadir una cierta cantidad de saliva a ambos tubos y agita de nuevo. Colocar los tubos en el vaso de precipitados, con agua, sobre la estufa y mantenlo caliente "al baño María" a 38ºC, durante 15-20', controlando la temperatura con un termómetro. No dejar que aumente la temperatura de este valor.

2. Al pasar este tiempo sacar los tubos y colócalos en la gradilla de nuevo.

3. Tomar 6 tubos, rotúlalos con el siguiente código y añadir las sustancias siguientes:

4. Tomar los tubos a los que has añadido Fehling (C1, G1, A1) y calentar suavemente (sin que hierva).

Tubo Color Resultado Molécula detectada

(+) (-)

C1 Azul cielo (no cambio de color) X Carbohidrato

C2 Amarillo (no cambio) x

G1 Azul grisoso a anaranjado x Carbohidrato

G2 Amarillo transparente no cambio x

A1 Azul cielo (no cambio) x Carbohidrato

A2 Morado oscuro x

Sacar los tubos con saliva y realizar un fehling con uno (S1) y añadir lugol al otro tubo (S2). Indicar los resultados obtenidos en la siguiente tabla:

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