Biologia molecular apuntes
Enviado por lesath • 11 de Enero de 2021 • Apuntes • 334 Palabras (2 Páginas) • 65 Visitas
Proteínas con carga positiva migran al polo…. Y las cargas empiezan a moversedespues de un tiempo se aplica un gel de avarosa (tiene poros)
Lo cual permitirá que pasen las moléculas (las grandes pasan lentas y las pequeñas pasan rápido)
Se utiliza para separar proteínas, péptidos, moléculas de ADN
Que se requiere para hacer una electroforesis
Una fuente de energía (carga + y -)
Un medio de soporte (el gel de agarosa, policriamina)
Una solución tampon (buffer) para que el ph se mantenga constante
Todo esto ocurre bajo la fuerza de un campo magnético
Fuente de energía eléctrica (tiene un ánodo y un cátodo)
Cualquier gel que permita la corrida electromagnética
La electroforesis en gel es la más usada
Tiene un soporte en gel
Se puede hacer horizontal (para ácidos nucleicos) o vertical (para proteínas)
Se agrega una solución de glicerol, esto permitirá visualizarla
Para tener la preparación del gel. El gel se mezcla con la solución tampón, y luego se funde a calor, para luego solidificarlo para que pueda funcionar como molde
Después que se enfrie, el gel esta listo para se llene con la solucion tampon de corrida (TRIS/ACETATO/EDTA)
La cubeta se le denomina cámara
Acidos nucleicos (carga negativa) migran al polo positivo +, debido a la atracción de los polos
Para que sirve electroforesis
Factore que afectan a la electroforesis
La carga eléctrica
Su tamaño molecular
Su hidrofidad y su forma
La magnitud del campo eléctrico
La temperatura del sistema
ACIDO NUCLEICOS
Lo primero es tener el molde (que consta de una base y un peine) listo, y aplicar en el molde la agarosa liquida, y esperar a que se enfrié y solidifiqué. Luego se retira el peine y se debe pasar la bandeja con el gel a la cubeta de electroforesis. Se debe llenar la cubeta con buffer de electroforesis. Luego cargamos las muestras en los pocillos. Después se debe cerrar la cubeta y conectar a la fuente de alimentación. Programamos el voltaje y comenzamos con la electroforesis. Una vez finalizada la electroforesis, retiramos el gel en una solución de bromuro de etio para así poder visualizar en el transiluminador
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