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TRABAJO DE HISTOLOGIA

ANDRES LEONARDO GONZALEZ ROJAS

BIOLOGIA

UNIVERSIDAD PEDAGOGICA Y TECNOLOGICA DE COLOMBIA

TUNJA

2013

TRABAJO DE HISTOLOGIA

PRESENTADO A:

CLARA INEZ ORJUELA

PRESENTADO POR:

ANDRES LEONARDO GONZALEZ ROJAS

PRESENTADO EN:

BIOLOGIA CELULAR (TRABAJO DE HISTOLOGIA)

ESCUELA DE BIOLOGIA

UNIVERSIDAD PEDAGOGICA Y TECNOLOGICA DE COLOMBIA

TUNJA

2013

INTRODUCCION

Con este trabajo se busca la comprensión completa de que es histología donde se explica que es una rama de la biología que comprende los tejidos de todos los seres vivos e inertes.

La histología es una de las ciencias que busca en si el estudio de la anatomía microscópica en otros términos la microscopia pues el estudio no se detiene en el tejido sino busca más a profundidad las células y demás organelos que abundan en los tejidos.

Este trabajo se basa en las reglas o metodología que se debe tener en cuenta para un buen desarrollo de preparación de micros preparados en diferentes tejidos como vegetales o animales, etc. Para llevar a cabo una preparación de tejidos perdurables en el tiempo mediante diferentes técnicas de preparación que se le puede llamar histotecnologia.

QUE ES HISTOLOGIA Y QUE HACE UN HISTOTECNOLOGO

La histotecnología es una subespecialidad de la tecnología médica de laboratorio.

Los histotecnólogos trabajan en laboratorios donde se observan tejidos y órganos de animales y plantas con microscopios ópticos (incluidos los tejidos humanos). Nosotros realizamos el trabajo previo necesario para que el material de estudio pueda ser examinado por otros científicos.

En lo que respecta al cuidado de la salud lo más común es ayudar al patólogo a determinar cuando un paciente tiene un cáncer.

El histotecnólogo también puede participar en numerosos tipos de investigaciones relacionadas con la medicina veterinaria, patología vegetal, etc.

Una especialidad muy relacionada realiza también un trabajo preparatorio para la examinación de tejidos para microscopía electrónica.

METODOLOGIA Y PRCTICA DE MICROPREPARADOS

PRIMERO: OBTENCION DE EL TEJIDO

El proceso histológico comienza con la obtención del tejido objeto de estudio. En el caso de los tejidos vegetales se toman muestras de los distintos órganos que componen el cuerpo de la planta, mientras que para los tejidos animales podemos optar por dos opciones: coger una porción de dicho tejido o procesar una parte, órgano o parte corporal, o el animal completo.

Los tejido obtenidos deben pasar por una serie de condiciones como las siguientes el tejido debe ser sano, joven y fresco en el tejido animal deben ser en promedio de 8 a un año el tiempo de maduración del tejido.

SEGUNDO: FIJACION

La fijación es en esencia un método para la preservación de la morfología y la Composición química de las células y los tejidos.

Consiste en producir la muerte de las células, de manera tal que las estructuras que poseían éstas en el estado viviente se conserven con un mínimo de modificaciones, a lo largo del tiempo y de los subsiguientes pasos de la técnica. Asimismo algunos métodos tratan de conservar intacta su composición química.

La fijación debe realizarse inmediatamente de extraer las células del organismo, para evitar las lesiones agónicas ocasionadas por la anoxia, que inicialmente producen cambios osmóticos y luego alteraciones estructurales y bioquímicas más profundas, fenómenos conocidos en conjunto como autolisis. Por el mismo motivo los fijadores deben actuar sobre fragmentos relativamente pequeños de tejidos (como regla general menos de 1 cm cúbico), para que la difusión del fijador desde las superficies hasta la parte central del bloque tisular se haga en un tiempo reducido.

Propiedades de los fijadores:

- Producen una rápida muerte celular, evitando la autolisis

- Preservan la morfología celular y tisular

- Preservan la composición química

- Penetran a los tejidos con relativa rapidez

- Facilitan la coloración posterior

- Inhiben el crecimiento microbiano y por lo tanto la putrefacción

- Aumentan la consistencia de los tejidos

- Algunos de ellos colorean sustancias de los tejidos

TABLA DE ALGUNOS FIJADORES DE LABORATORIO USUALES

- Químicos

simples - Alcoholes - Metanol

- Etanol

- Aldehídos - Formaldehído

- Glutaraldehído

- Acidos - Acético

- Pícrico

- Osmico

- Sales - Bicromato de potasio

- Bicloruro de mercurio

- Mezclas de

químicos - Carnoy - Alcohol etílico +

Ácido acético

- Bouin - Acido pícrico +

Formol +

Ácido acético

- Zenker - Bicromato de potasio +

Bicloruro de mercurio +

Ácido acético

FaGlu - Formaldehído +

Glutaraldehído

En el laboratorio se utilizó en tejidos vegetales carnoy como elemento fijador y en tejidos animales se utilizó formol al 10 por ciento.

En tejidos animales

Preparación del formol:

El formol comprando o a la venta viene con una concentración de 3 por ciento, se rinde con agua para rebajarlo o condicionarlo al 10 por ciento, se toma nueve porciones de agua en el mismo frasco de formol.

Si el tejido es animal se somete a formal aldehído durante un tiempo estimado de 6 a 12 horas y luego se coloca a deshidratación.

En tejidos vegetales

Preparación del Carnoy:

El carnoy a diferencia del formol hay que prepararlo aparte de esto su preparación es muy fácil, con 3 partes de alcohol glacial 1 parte de ácido acético más unas pocas gotas de formal aldehído (formol) ya contienen el carnoy. Las gotas de formol se pueden despreciar.

Si el tejido vegetal es sometido a carnoy se deja durante un tiempo estimado de 6, 12 hasta 18 horas y luego se coloca a deshidratación.

TERCERO: DESHIDRATACION DE TEJIDOS

El procedimiento consiste en extraer el agua contenida en el tejido y reemplazarla por un líquido deshidratante como el alcohol, la acetona o el propanolol. Lo más utilizado es el alcohol en concentraciones crecientes, 70, 80, 90 y 96 grados. La deshidratación es realizada cada tres horas.

TABLA DE REACTIVOS DE DESHIDRATACION

NOMBRE PORCENTAJE TIEMPO DE REACCION

ALCOHOL 50 POR CIENTO 3 HORAS

ALCOHOL 60 POR CIENTO 3 HORAS

ALCOHOL 70 POR CIENTO 3 HORAS

ALCOHOL 80 POR CIENTO 3 HORAS

ALCOHOL 90 POR CIENTO 3 HORAS

ALCOHOL 95 POR CIENTO 3 HORAS

ALCOHOL 98 POR CIENTO 3 HORAS

ISOPRPANOL ISOPRPANOL 1 HORA

ISOPRPANOL ISOPRPANOL 1 HORA

ISOPRPANOL ISOPRPANOL 1 HORA

ACETONA ACETONA 1 HORA

La deshidratación es el proceso de extraer el agua del tejido tomando un gradiente de alcohol menor, para mejor comprensión es extraer los alcoholes con el aumento de alcoholes, comenzando por un alcohol menor a un alcohol mayor.(el cambio de alcoholes debe ser continuo).

TRANSPARENCIA

Consiste en someter el tejido a un disolvente derivado de el benceno llamado XILOL (En histología se emplea en los últimos pasos de preparado de muestras, tornando transparente el tejido para observarlo con claridad con microscopia de luz).

XILOL 1 EL TEJIDO DEBE PERMANECER DURANTE 2 HORAS

Y DESPUES SE PASA O SE SOMETE AL SEGUNDO XILOL

XILOL 2 EL TEJIDO DEBE PERMANECE DURANTE 2 HORAS

CUARTO: IMBIBICION

La imbibición es un proceso en el cual se somete la muestra a un secado después de haberla sacado del XILOL mediante de un secado ambiente.

Luego se pasa a un recipiente de vidrio con parafina esto busca en el tejido endurecerlo a cierto punto que cuando se empieza a cortar no se doble y sea más rápido ubicarlo en cubo de inclusión, para esto el tejido se somete a parafina luego de colocarla se mantiene caliente en el horno a 56 a 54 grados. La muestra hasta el día de la inclusión.

QUINTO: INCLUCION

Para los cortes que deben observarse con el microscopio óptico se usa casi exclusivamente la parafina.

Dado que ésta es una sustancia hidrofóbica.

La parafina se somete hasta su punto de fusión donde se saca el tejido de la imbibición y se somete a la inclusión que en otros términos es sacar el tejido duro y ponerlo en forma de que pueda ser cortado, así formando los tacos histológicos o cubos de bloqueo.

SEXTO: CORTE

Los tejidos deben ser cortados en láminas delgadas para posibilitar su observación con el microscopio, los instrumentos utilizados para la obtención de cortes son los micrótomos. Básicamente, todos los tipos de micrótomo constan de una navaja muy afilada que seccionará el taco histológico y un mecanismo de avance automático regulable

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