Celulas procariotas CELLULAR DIVERSITY PROKARYOTE CELLS

DIVERSIDAD CELULAR CÉLULAS PROCARIOTAS

TINCIÓN Y SU OBSERVACIÓN

CELLULAR DIVERSITY PROKARYOTE CELLS

STAINING AND ITS OBSERVATION

Víctor Charry,    Frederman Mora,   Esneider peña,   Jesús Escorcia

RESUMEN

El objetivo de estas prácticas del laboratorio fue reconocer las características distintivas de las bacterias, que solo se pueden visualizar con ayuda del microscopio para su observación con los aumentos de los (objetivos 4x.10x, 40x). Mediante procesos de TÉCNICA PARA LA COLORACIÓN DE BACTERIAS que entre esto tenemos la Coloración Simple y Coloración de Gram (Técnico de Hucker); Para determinar la clasificación de las bacteria según su forma (morfológica), en esta práctica se realizaron muestras de diferentes tipos de yogures, se obtuvo como resultado distintos tipos de bacterias como (COCOS, ESTREPTOCOCO Y ESTAFILOCOCOS), estas bacterias se pudieron observan en el objetivo 40x, en yogures de marca (Yogur Griego, Bon Yurt, Alpina).

Palabras Claves: bacteria, microscopio, técnica de Gram.

ABSTRACT

The objective of these laboratory practices was to recognize the distinctive characteristics of the bacteria, which can only be visualized using the microscope for observation with the magnifications (objectives 4x. 10x, 40x). Through processes of technique for the coloring of bacteria that between this we have the Simple coloration and coloration of Gram (Hucker technician); To determine the classification of the bacteria according to their form (morphological), In this practice samples were made of different types of yoghurt, it was obtained as a result different types of bacteria such as (coconuts, Streptococcus and staphylococci), these bacteria could be observed in objective 40x, in brand yogurts (Yogur Griego, Bon Yurt, Alpina).

Key words: Bacterium, microscope, Gram technique.

INTRODUCCIÓN

La tinción de Gram es una prueba de laboratorio rápida, potente y sencilla, en el cual se utiliza rutinariamente en los estudios microbiológicos de las bacterias,  que permite al investigador distinguir entre dos clases fundamentales de la bacteria (GRAM + y GRAM -). Fue diseñada por Christian Gram, su objetivo era conseguir una prueba con la que fuera posible diferenciar diferentes grupos de bacterias para así poder estudiar y clasificarlas. Esta prueba se convirtió muy útil, no solo para el estudio de la bacterias sino también para poder identificar rápidamente una infección. La técnica se basa en aplicar una serie de colorantes a una muestra de cualquier origen que supuestamente contenga bacteria no identificados, los colorantes tiñen la pared de la bacteria de color morado y tras unos minutos se realiza un lavado del colorante. Después de eso puede que el colorante permanezca en la pared bacteriana o que se haiga ido. En el primer caso permanecerá el color morado y se tratara de bacterias gran positiva y en el segundo la pared tendría un color rosado y serian Gram negativa.         Estos dos grupos de bacterias son pilares en lo que se basa la clasificación de la amplia mayoría de las bacterias. Cada uno de los grupos responde a diferentes tipos de antibióticos, por eso es una técnica útil para seleccionar el formato antimicrobiano inicial ante una inyección.

MATERIALES Y MÉTODO

Instrumentos:

Portaobjetos, Cubreobjetos, Goteros, Asa, Pinza, Mechero, Microscopio.

Materiales:

Agua destilada, Cristal violeta, Yogurt, Solución de Lugol, Etanol 95º Solución Fucsina o Safranina para contra teñir.

Procedimiento:

COLORACION SIMPLE

Extendido

Disolver yogur con agua  y luego con un asa esterilizada introducirla en el yogur y pasar el asa por un portaobjeto haciendo una pequeña y trasparente capa de yogur, después pasar el portaobjeto por el mechero para secar.

1. Preparar una frotis según la técnica habitual antes descrita.
2. Colocar el portaobjeto sobre un soporte para tinciones.
3. Cubrir la preparación con dos o tres gotas de solución de cristal violeta y dejar 30 segundos.
4. Lavar con agua.
5. Secar por encima del mechero.
6. Observar en el lente de inmersión y determinar la forma y disposición y la relación de tamaño de distintas bacterias

COLORACIÓN DE GRAM (TÉCNICA DE HUCKER)

Extendido

Disolver yogur con agua  y luego con un asa esterilizada introducirla en el yogur y pasar el asa por un portaobjeto haciendo una pequeña y trasparente capa de yogur, después pasar el portaobjeto por el mechero para secar.

1. Preparar una frotis según la técnica antes descrita.
2. Colocar el portaobjeto sobre un soporte para tinciones.
3. Cubrir con solución cristal violeta y dejar actuar 1 min.
4. Lavar suavemente con agua de pluma o grifo.
5. Cubrir con lugol y dejar actuar 1 min.
6. Lavar de la misma manera.
7. Cubrir con etanol de 95% y dejar 30s moviendo suavemente la lámina. Seguir lavando hasta que este no arrastre más colorantes.
8. Lavar con agua.
9. Cubrir con solución de safranina de Gram y dejar 1 min.
10. Lavar y secar. Observar con el objeto de inmersión y determinar la forma, disposición y reacción de tamaños de distintas bacterias.

RESULTADOS

1. Visualización sin coloración

Aquí podemos observar una muestra sin teñir de un yogur marca griego.

-Objetivó 4X: se puede observar la muestra en blanco y gris pero algo nubloso y tampoco se pueden observar las bacterias.

       - Objetivó 10X: en este objetivo la imagen se ve más nítida pero se sigue viendo solo manchas blancas y gris metálico.

    -Objetivó 40X: es este objetivo la muestra se puede observar como si fuera algo metálico ya que al ser muy nítida los coloras blanco y gris se ven metálicos y tampoco se pueden identificar ninguna bacteria.

[pic 1]

 Figura #1-a

[pic 2]

Yogur Griego sin teñir a objetivo 4X

[pic 3]

Figura #1-b

[pic 4]

Yogur Griego sin teñir a objetivo 10X

[pic 5]

Figura #1-c

[pic 6][pic 7]

1. Visualización de coloración simple

Aquí podemos ver una muestra teñida de coloración simple  y podeos observar las bacterias encontradas en un yogur de manca griego.

 -Objetivó 4X: en este objetivo se puede observar que la muestra ya no es de color gris y blanca ahora gracias al teñido la muestra es de color blanca con violeta gracias al tinte de cristal violeta, en este objetivo no se puede determinar dónde están la bacterias.

...