Concentracion de sutarto y pH en actividad enzimatica

[pic 1][pic 2]Instituto Politécnico Nacional

Escuela Nacional de Ciencias Biológicas

Bioquímica General

Práctica #5 pH y concentración Diaz Rodríguez Alexis, Grupo: 4QV1 Sección 2

Introducción:

Las enzimas son muy importantes  por sus diferentes aplicaciones, las enzimas solo son activas en un margen limitado de pH, y en muchos casos este margen es estrecho y definido.
Además sabemos que la curva de actividad enzimática contra el pH está determinada por los efectos:

1. Desnaturalización de las enzimas a valores de pH extremos.
2. Cambios en el estado de ionización de la enzima y del sustrato.
3. Cambios en el tipo de unión entre la enzima y el cofactor
4. Modificación en la afinidad de la enzima por el sustrato para formar el complejo enzima-sustrato (ES).

Por otro lado, dos moléculas de enzima actúan independientemente en solución el doble de sustrato que una sola molécula de enzima en tiempo t; la velocidad es, por lo tanto, directamente proporcional a la concentración de enzima, lo que se expresa como:

Vo= k[E]

La gráfica típica que se obtiene al expresar la velocidad de reacción en función a la concentración de enzima; es una pendiente recta positiva.

Objetivos:

• Demostrar que la velocidad de la reacción enzimática es directamente proporcional a la concentración enzimática.
• Analizar la importancia del pH del medio sobre la velocidad de una reacción enzimática y su efecto sobre el carácter iónico de la enzima y del sustrato.

Resultados:

Tabla 1.  Resultados de la concentración de enzima sobre la velocidad de reacción.

[pic 3]

Fig 1. Gráfica de la concentración de enzima sobre la velocidad de reacción

Cálculos:

Y=a+bx

Y= Absorbancia                a=0.0374

X= Concentración                 b=0.1258

Concentración=  [pic 4]

Concentración = = 2.419 μmoles de Ar [pic 5]

Velocidad= x =0.2419 [pic 6][pic 7]

Discusiones:

La práctica se realiza por medio de estudios de cinética enzimática, considerando factores que van a condicionar la actividad de las enzimas.

a concentración Lde enzimas tenemos un comportamiento más controlado ya que las enzimas, sabemos que dos moléculas de enzima van a actuar independientemente en solución de doble sustrato que una sola molécula de enzima en un tiempo determinado, por eso tenemos, que a mayor concentración de enzima como se muestra en la Fig. 1, obteniendo el comportamiento de una pendiente recta positiva.

...