Evaluación del efecto del pH sobre la actividad enzimática de la invertasa

UNIVERSIDAD DE LAS FUERZAS ARMADAS -ESPE[pic 1][pic 2]

DEPARTAMENTO DE CIENCIAS DE LA VIDA

Y LA AGRICULTURA

LABORATORIO DE ENZIMOLOGÍA

NOMBRES:  Guerrón Sergio                        PRÁCTICA No: 1 

                        Noroña Cristina                       NRC: 4324

                        Romo Silvana                          FECHA DE ENTREGA: 27/06/2018

                        Ricardo Tello  

1. TEMA DE LA PRÁCTICA:  Evaluación del efecto del pH sobre la actividad enzimática de la invertasa.
2. OBJETIVOS

1. General

• Identificar-….

1. Específicos

• Comprobar l…

1. INTRODUCCIÓN

1. MARCO TEÓRICO

1. MATERIALES Y MÉTODOS

El siguiente protocolo fue tomado y ejecutado en los Laboratorios de Docencia de Biotecnología ESPE (2018).

1. Materiales y Reactivos

Elaborado por Guerrón et al, (2018) 

1. Metodología

Obtención del extracto enzimático: Se suspendió 1 g de preparado liofilizado de levadura en 200 ml de tampón de extracción (tampón acetato 0,1 M, pH 5,0, en NaCl 0,5 M). Se agitó la mezcla durante 15 min, se centrifugó y tomó el sobrenadante como extracto enzimático (Tena, 2008).

Identificación cuantitativa de la invertasa: Se prepararó un blanco y dos tubos con la solución problema para los diferentes valores de pH de acuerdo a la tabla uno. El ensayo se realizó por duplicado, se incubó a 55°C por diez minutos.

Tabla 1: Contenido de los tubos blanco de sustrato y tubos problema

Después de la primera incubación se tomó 0.1ml de cada tubo y se añadió 1ml de reactivo DNS y posteriormente se incubó nuevamente a 92°C durante 15 minutos. Por último, se midió las absorbancias mediante el espectrofotómetro para determinar la actividad enzimática.

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