Determinacion De GOT Y GTP

OBJETIVOS:

 Determinar los niveles de transaminasa GOT Y GTP en suero sanguíneo.

 Comparar los valores normales de transaminasas con los valores obtenidos.

 Aprender a maniobrar la propipeta y micropipeta.

FUNDAMENTO:

 La determinación de la transaminasa glutámico oxalacética o aspartato aminotransferasa (GOT) se basa en la siguiente reacción:

 La determinación de la transaminasa glutámico pirúvica o alanina aminotransferasa (GPT) se basa en la siguiente reacción:

• El piruvato formado (el oxalacetato es inestable y se transforma en piruvato), reacciona con la 2,4-dinitrofenilhidracina produciéndose, en medio alcalino, un compuesto coloreado que se mide a 505 nm.

 Reacción química de coloración:

MATERIALES Y REACTIVOS:

T. de ensayo Jeringas de 5 ml

Gradilla Vaso de precipitados

Suero sanguíneo Espectrofotómetro

Pipeta Propipeta

Lentes de protección Guantes

Mascarilla Gorro

Centrífuga Micropipeta

l-aspartato 100mM y alfa-cetoglutarato 2mM en buffer de 100mM dl-alanina 200 mM y alfa-cetoglutarato 2mM en buffer de 100mM

2,4-DNFH en ácido clorhídrico. NaOH 4 M

Piruvato de sodio 2mmol/l

RESULTADOS:

• Absorbancia en espectrofotómetro:

- Muestra blanco: 0.026

- GOT : 0.023 nm

- GPT: 0.029 nm

0.034 -------------- 5 0.034 --------------- 5

0.023 --------------- X 0.029 --------------- X

X = 3.3823 U/L X= 4.2647 U/L

DISCUCIONES:

- Los resultados que obtuvimos de transaminasas GOT y GPT en la mesa #1, se compararon con las demás mesas de trabajo (#2 y #3), los cuales no coincidían, posiblemente por un mal procedimiento en la técnica.

- Por los resultados que obtuvimos (GOT 3.38 U/L y GPT 4.26 U/L), podemos decir que no consideramos al alumno como un paciente sospechoso porque se encientra en el

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