EXTRACCIÓN DEL ADN

PRACTICA DE BIOLOGIA

EXTRACCIÓN DEL ADN

OBJETIVO:

• Examinar un extracto crudo de ADN de células animales y confirmar su estructura fibrilar.

FUNDAMENTO TEORICO

El ácido ribonucleico (ARN) y el ácido desoxirribonucleico (ADN) son macromoléculas que intervienen en el almacenamiento y en la transferencia de la información genética. Son componentes fundamentales de la célula y constituyen, en conjunto, entre el 5 y el 10% del peso seco.

Normalmente no se encuentran solos sino que se hallan formando nucleoproteinas, ya que suelen unirse a determinados tipos de éstas como las histonas.

El ARN se localiza tanto en el citoplasma celular como en el núcleo, mitocondrias y cloroplastos, mientras que el ADN se sitúa fundamentalmente en el núcleo de la célula, y también cloroplastos y mitocondrias en pequeñas cantidades.

Poseen una importancia manifiesta por el hecho de que ellos dirigen y llevan a cabo la síntesis de proteínas y, por tanto, de los enzimas necesarios para el funcionamiento celular.

Por otra parte, el ADN es el vehículo de la herencia, que se transmite de padres a hijos, de generación en generación.

El ADN se puede aislar mediante una técnica relativamente sencilla. Consiste, en primer lugar, en romper las membranas celulares para liberar los núcleos. Para ello se tritura el hígado de pollo en el mortero.

Al añadir una solución hipertónica como el NaCl 2M se produce el estallido de los núcleos. El detergente forma un complejo con las proteínas y las separa del ADN. El alcohol tiene como función la de precipitar el ADN, que se va agrupando para dar lugar a la formación de unas fibras blancas visibles a simple vista que se pueden colorear mediante un colorante selectivo para el ADN como el anaranjado de acridina.

MATERIALES

Materiales biológicos: hígado de pollo, timo o gónodas de choros (El tejido debe ser fresco y conservado en frío).

Materiales de laboratorio y reactivos:

 2 tubos de ensayo grandes

 1 vaso de precipitado de 250 ml

 Embudo

 1 agitador

 1 gradilla

 Mortero

 Pipetas

 Probetas

 Solución salina de NaCl al 0.15 M/EDTA 0.1 M Ph:8

 Dodecil-hidrogenio-sulfato

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