EXTRACCION DE ADN

Trabajo de laboratorio

Extracción de ADN vegetal.

Los estudiantes extraerán ADN de bananas licuadas con agua. Una parte de esta mezcla de banana, luego es tratada con shampoo y sal, mezclada durante 5-10 minutos, y luego escurrida a través de un filtro de café. A lo filtrado se le agrega alcohol frío y es éste el momento cuando el ADN de la solución de banana se precipita y se hace visible.

El detergente disuelve los lípidos (moléculas grasas) y las proteínas de la membrana celular, rompiendo las uniones que mantienen la integridad de la misma. De esta forma se libera el contenido celular. Luego, el detergente forma complejos con los lípidos y las proteínas, permitiendo que los mismos sean separados del ADN por filtración. Así se libera el ADN. La sal permite que el ADN precipite en una solución fría de alcohol y que las cadenas de ADN no se corten.

Nota para el docente: se recomienda que el material vegetal utilizado sea con poca coloración para facilitar la observación de los resultados, como ser, bananas o cebollas. En este caso se hará extracción de ADN de banana. Al final de la guía práctica se sugiere una serie de preguntas para analizar con los alumnos los resultados de la experiencia.

Materiales:

1 taza o vaso de plástico (por grupo)

Licuadora

Una cuchara plástica para medir y mezclar

2 filtros de papel de café Nº 2 (conos)

Agua destilada

Shampoo de color claro

1 banana

Sal de mesa, con o sin Iodo

1 tubo de ensayo sellado que contenga 95% de etanol o 91% de alcohol isopropílico

1 conservadora con hielo para enfriar los tubos con alcohol

1 varilla de vidrio o 1 pipeta Pasteur

Procedimiento para la extracción del ADN

Preparar una solución de banana procesada con sal, agua destilada y shampoo (detergente) mediante los siguientes pasos:

1. En una licuadora, mezclar una banana por taza de agua destilada (250ml).

2. Licuar por 15-20 segundos, hasta que la solución se mezcle.

3. En una taza, preparar una solución consistente en una cucharadita de té de shampoo y dos pizcas (2 espátulas chicas) de sal.

4. Agregar 20 ml (3 cucharas soperas) de agua destilada.

5. Disolver la sal y el shampoo revolviendo lentamente con la cuchara de plástico evitando formar espuma.

6. A la solución preparada en los pasos 3 a 5, agregar dos cucharas soperas de la mezcla de banana obtenida según 1 y 2.

7. Mezclar la solución con la cuchara por 5-10 minutos.

8. Mientras uno de los miembros del grupo mezcla la solución de banana, otro miembro pondrá el filtro Nº 2 de café dentro de otra taza de plástico.

...