LA TÉCNICA DE DNA RECOMBINANTE?

PARA QUÉ SE USA LA TÉCNICA DE DNA RECOMBINANTE?

RESUMEN

Todos los organismos, aun el más simple, contienen una enorme cantidad de información. Esa información le permite tener características que lo hacen verdaderamente diferente de los otros individuos.

Como es el tema de estudio el DNA recombinante podemos decir que es una molécula de DNA artificial formada de una manera delibrada in vitro por la unión de secuencias de DNA provenientes de dos organismo de especies diferentes que regularmente no se encuentren juntos.

Al introducirse este DNA recombinante en un organismo se produce una modificación genética que proporciona la adición de un nuevo DNA al organismo sobrellevar la modificación de rasgos existentes o la expresión de nuevos rasgos.

Palabras claves: DNA recombinante, DNA artificial, in vitro, genética, organismos

¿Cómo se llega a identificar y aislar un gen? ¿Cómo se puede saber qué porción de toda esa grn molécula que es el ADN, codifica para una determinada proteína? ¿cómo es su región reguladora? ¿cuántos exones e intrones posee?

Las técnicas de ingeniería genética, tambien llamadas tecnologías del ADN recombinante, brindan una metodología apropiada para responder estas preguntas. Actualmente, tanto las regiones codificantes como las no codificantes del genoma son aisladas y estudiadas a diario. Más aun, la utilización de las tecnologías del ADN recombinante permiten saber cómo es la secuencia nucleotídica de una porción de ADN y, de desearlo, generar cambios en dichas secuencias. Esto ha permitido a muchos investigadores "crear" determinados fenotipos que no se hubieran obtenido por cruzamientos tradicionales entre individuos y, por añadidura, se ha facilitado no sólo el estudio mása detallado de la función de determinados genes, sino que ha tenido gran repercusión en áreas como la mediicna, la agricultura y la industria.

Si tuvieramos que resumir los principales pasos de este conjunto de técnicas diríamos que son los siguientes:

1.- Obtención del ADN del organismo a estudiar (ADN genómico), aislado del resto de las moléculas celulares.

El ADN genómico constituye una macromolécula de característica viscosa y, gracias a esta propiedad, su aislamiento es relativamente sencillo. Cuando se realiza una lisis celular en forma gradual, el contenido celular se dispersa en la solución de incubación y el ADN puede ser "pescado" con una varilla de vidrio o bien precipitado en presencia de alcohol.

2.- Fragmentación del ADN en segmentos discretos.

Una vez que se ha logrado obtener el ADN es posible aislar un determinado gen de toda esa gran macromolécula. Sabemos que en el genoma, la mínima unidad fragmentada es el cromosoma, pero, como cada cromosoma contiene muchos genes, es preciso obtener segmentos aún más pequeños. Pero...¿cómo hacer para "cortar" el ADN en porciones más pequeñas?

La respuesta provino del campo de la genética bacteriana. En efecto, en las bacterias existen unas enzimas que son capaces de reconocer secuencias específicas de ADN y separar la unión fosfodiester entre 2 nucleótidos. Así, estas enzimas dan como resultado dos segmentos de ADN. En las bacterias esto es posible sólo si el ADN a ser fragmentado no proviene de la misma cepa, o sea que es un ADN foráneo. Estas enzimas, cuya función biológica es atacar a organismos extraños dentro de las células bacterianas, se denomina enzimas de restricción y son las que se utilizan en forma rutinaria para obtener segmentos de tamaños discretos del ADN que se desea estudiar.

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