La detección y la secuenciación del virus Zika del líquido amniótico de los fetos con microcefalia en Brasil: un estudio de caso

La detección y la secuenciación del virus Zika del líquido amniótico de los fetos con microcefalia en Brasil: un estudio de caso

(Buena y detallada información)

Introducción

Desde 2015, Brasil ha estado enfrentando una emergencia de salud pública en relación con el aumento dramático en el número de bebés nacidos con microcefalia. Los datos epidemiológicos indican que hasta un 6 Ene, 2016, se reportaron 4783 casos en 21 estados en el norte, noreste, sur, y Sudeste de Brasil. 1 Esta incidencia de microcefalia es 20 veces mayor que en años anteriores, alcanzando 99 · 7 por cada 100 000 nacidos vivos, y entre ellos 76 muertes de recién nacidos al 6 de enero, 2016. 1

Cuando se diagnostica de forma prenatal mediante ecografía, microcefalia congénita es un fuerte predictor de los resultados neurológicos adversos. 2 Según la definición de la OMS, microcefalia se produce siempre que la circunferencia frontal occipital de la cabeza del niño recién nacido o el feto es de 2 desviaciones estándar menor que la media de la misma edad y sexo. 3 un tamaño del cerebro que es significativamente diferente a la del rango normal es un factor de riesgo importante para el retraso cognitivo y motor. 4 la microcefalia se asocia a varias causas, incluyendo trastornos genéticos (por ejemplo, autosómica recesiva microcefalia, Aicardi- El síndrome Goutières, trisomía cromosómica, el síndrome de Rett, y X-cromosómica microcefalia); drogas y productos químicos embriaguez de la madre embarazada (por ejemplo, consumo de alcohol, la cocaína o las drogas antiepilépticas, plomo o intoxicación por mercurio, o radiación); la desnutrición materna; y la infección transplacentaria con virus o bacterias. 5 infecciones virales maternas como rubéola, citomegalovirus, herpes simple, virus de la varicela zoster, el VIH, y arbovirus tales como Chikungunya, también se han asociado con microcefalia en los recién nacidos. 5  y  6

La investigación en contexto

La evidencia antes de este estudio

Muchos casos de microcefalia en los recién nacidos en Brasil se han producido en regiones en las que también se han detectado infecciones de virus Zika y otros arbovirus. Se realizaron búsquedas en PubMed con la búsqueda de términos "Zika", y "microcefalia" de los artículos publicados hasta el 5 de febrero de 2016. Se encontraron 11 artículos que sugerían una posible relación entre el virus Zika y microcefalia en los recién nacidos. Presentación de un caso corto por nuestro grupo, reportando las pruebas de ultrasonido de los dos casos microcefalia fetal aquí presentados, se ha publicado previamente. Nuestra búsqueda ha encontrado ninguna otra clara evidencia de que el virus Zika podía cruzar la barrera placentaria e infectar al feto humano.

Valor añadido de este estudio

Este estudio presenta los datos virológicos y genéticos que implican el virus Zika en los dos casos de malformación fetal que describimos brevemente en nuestro caso anterior. Se utilizó cuantitativa PCR de transcripción inversa y la tecnología metagenómica viral aplicado a muestras de líquido amniótico obtenido a partir de las dos mujeres embarazadas con fetos con microcefalia, y se obtuvieron las secuencias del genoma del virus Zika. El estudio de estos casos proporciona evidencia empírica de la asociación entre la infección por el virus Zika durante el embarazo y la microcefalia fetal. Por otra parte, hemos aislado de todo el genoma del virus Zika directamente del líquido amniótico de dos mujeres embarazadas, y las pruebas presentadas para apoyar los hallazgos previos que indican que el origen del virus es la Polinesia Francesa.

Implicaciones de todas las pruebas disponibles

Sobre la base de nuestros resultados, virus Zika debe ser considerada como un agente causal posible en casos de microcefalia, especialmente durante los brotes de virus Zika en regiones endémicas. Nuestro trabajo pone de relieve no sólo la importancia de controlar el Aedes aegypti población de mosquitos, mientras que no existe una vacuna o antiviral está disponible, sino también la necesidad de realizar más estudios para comprender los mecanismos de inmunopatogenicidad que conducen a una malformación congénita debido a la infección por el virus Zika.

La evidencia epidemiológica sugiere que la infección por el virus Zika de las mujeres embarazadas en Brasil podría estar asociado con el creciente número de casos de microcefalia congénita reportados en el país. Se han encontrado varias especies de mosquitos que están infectados naturalmente con el virus Zika, incluyendo Aedes africanus, Aedes luteocephalus, Aedes hensilli, Aedes polynesiensis, dalzielii Aedes, Aedes albopictus, apicoargenteus Aedes, y Aedes aegypti entre otros, pero se sabe poco acerca de su competencia vectorial . 7 , 8 , 9  y  10 a aegypti es la especie de mosquito abrumadoramente predominante que se encuentra en Brasil, y también se asocia con otros arbovirus ya informados en Brasil, tales como los virus del dengue y chikungunya.

Virus Zika fue aislado de los seres humanos en Nigeria 7 durante los estudios realizados en 1954. Otros casos fueron reportados en otros países africanos 11 (Uganda, Tanzania, Egipto, Sierra Leona, Gabón, Nigeria, Costa de Marfil, Camerún, Senegal, y República Centroafricana), en los países asiáticos (India, Pakistán, Malasia, Filipinas, Tailandia, Camboya, Vietnam e Indonesia), en varias islas del Pacífico desde 2007 (Estados Federados de Micronesia, las Islas Cook, Polinesia francesa, Nueva Caledonia , Guam, Samoa, Vanuatu y las Islas Salomón), y desde aproximadamente principios de 2015 en las Américas (Chile, Colombia, el Salvador, Guatemala, México, Paraguay, Surinam, Venezuela, Canadá y los EE.UU.). 9 , 10 , 11 , 12 , 13 , 14  y  15 brotes de infección por el virus Zika en la isla de Yap (en 2007) y en la Polinesia francesa (2013-14), con una mayor propagación de Nueva Caledonia, las Islas Cook, y la isla de Pascua, han demostrado la propensión de esta especie arbovirus que se extienden fuera de su área geográfica de costumbre y para causar grandes brotes.

Los primeros casos autóctonos del virus Zika en Brasil fueron confirmados en mayo de 2015. 16 la circulación del virus A partir de entonces, a partir del 6 Ene de 2015, 21 estados han confirmado, con una mayor prevalencia en la región Nordeste. 17 Los informes de incidencia microcefalia en Brasil geográficamente solaparse con informes de virus Zika; la mayoría de las madres cuyos bebés fueron diagnosticados con microcefalia quejado durante sus embarazos de manifestaciones clínicas, como la fiebre baja, dolor de cabeza y erupciones cutáneas, que podrían haber sido síntomas de la infección por el virus Zika o infección con cualquier otra especie de arbovirus que es frecuente en la región.

A la vista de este potencial asociación entre la infección por el virus Zika y el creciente número de casos de microcefalia, el Ministerio de Salud de Brasil y la OMS han recomendado que las mujeres embarazadas deben tomar precauciones para evitar el contacto con todos los vectores potenciales, ya que ningún tratamiento antiviral específico para Zika existe infección por el virus. 1

Pequeños fragmentos del genoma de la cepa del virus Zika que circula en Brasil se han secuenciado y análisis filogenético ha indicado que el virus es similar a la que circulaba en la Polinesia Francesa en 2013. 16  y  17 Sin embargo, evidencia que vincula a la alta incidencia de la microcefalia a la presencia del virus Zika es escasa. En enero de 2016, nuestro grupo reportó evidencia la imagen de ultrasonido de dos casos de microcefalia fetal en las mujeres que se habían quejado de síntomas del virus Zika-como durante el embarazo, y nos informó de los resultados de la PCR preliminares breves, lo que confirma la presencia del virus Zika en el líquido amniótico. 18 en este estudio de caso, que se expanden en estos hallazgos se informó anteriormente, y describir la forma en que usamos la transcripción inversa cuantitativa PCR (RT-qPCR) y metagenómica viral para detectar y secuenciar el genoma del virus Zika en las muestras de líquido amniótico de estas dos mujeres embarazadas con fetos microcefálicos.

métodos

Historias de casos

El primer caso en nuestro estudio fue de una mujer de 27 años de edad en su primer embarazo, a partir de un centro urbano en el estado de Paraíba, en la región Nordeste de Brasil (paciente 1). Su atención prenatal fue sin incidentes hasta principios de septiembre de 2015, cuando, a las 18 semanas de gestación, la mujer desarrolló una erupción cutánea con picor de las manos y la espalda. Sobre la base de su estado clínico, se le diagnosticó a una unidad de servicio de emergencia con la reacción alérgica, y se le prescribió hidrocortisona intravenosa. Al día siguiente, sus síntomas empeoraron ya que desarrolló fiebre y mialgias. Tenía Ultrasonido normal a las 16 semanas. El paciente no había viajado fuera del estado de Paraíba, durante los últimos años, y que no había tenido contacto con alguna de las personas enfermas. Ella no tenía inmunodeficiencia o enfermedades autoinmunes. A las 21 semanas de gestación, una ecografía más indicado un diagnóstico microcefalia fetal con ventrículomegalia moderado y agenesia parcial del vermis cerebeloso. Una tercera ecografía realizada a las 27 semanas confirmó el diagnóstico microcefalia con dilatación de los ventrículos relevante, la asimetría de los hemisferios y el cerebelo hipoplásico con total ausencia de vermis cerebeloso. El paciente estaba sano y estable durante los procedimientos de ultrasonido y la amniocentesis. Los resultados de todos los exámenes de laboratorio no mostraron diabetes y trastornos de presión sanguínea relacionada. Además, el paciente no informó de tomar cualquier medicamento (aparte de la hidrocortisona), el uso de drogas, el consumo de alcohol o fumar durante el embarazo. 1 paciente todavía está siendo supervisada por los médicos en nuestro grupo. A las 40 semanas de gestación el feto presenta microcefalia con áreas de calcificación y circunferencia de la cabeza de 29 cm evaluados mediante ecografía antes del nacimiento. El bebé nació a las 40 semanas de gestación y tenía una circunferencia de la cabeza real de 30 cm.

...