Linea del tiempo biologia molecular
Enviado por daliau • 16 de Enero de 2023 • Trabajos • 743 Palabras (3 Páginas) • 59 Visitas
CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLÓGICO
Industrial y de servicios No.2
SUBMODULO: IDENTIFICA MICROORGANISMOS CON BASE EN TECNICAS BACTERIOLÓGICAS
PRACTICA: COPROCULTIVO Y TINCIÓN GRAM
LABORATORIO CLINICO
CATEDRATICO: Q.B MATILDE CRUZ APARICIO
ALUMNA: DALIA LÓPEZ CRUZ
FECHA: 7 Y 8 DE NOVIEMBRE DEL 2018
3”k”
INTRODUCCION
Practica realizada: Coprocultivo y tinción Gram.
El coprocultivo es la siembra de una muestra adecuada de heces en medios de cultivo para el desarrollo de bacterias entéricas patógenas. Una muestra adecuada es aquella que ha sido recolectada durante el periodo agudo de una enfermedad. Para realizar esta siembra la, materia fecal no debe estar contaminada con agua, orina o tierra porque nos puede llevar a resultados erróneos o falsos.
OBJETIVOS
- Aplicar las normas del RPBI para cuidarnos.
- Poder manejar muestras biológicas altamente patógenas.
METODOLOGIA
MATERIAL:
- Asa bacteriológica
- Medio de cultivo
- Portaobjetos
- Lápiz graso
- Soporte para tinción
- Bascula
- Espátula
- Vidrio de reloj
- Matraz Erlenmeyer
- 2 cajas de Petri
- Mechero bunsen
- Tripie
- Tela de asbesto
- Varilla de vidrio
- Microscopio
REACTIVOS:
- Fenol
- Lugol
- Safranina
- Colorante de cristal violeta
- Alcohol-cetona
- Cultivo problema
- Solución salina
MUESTRA:
- Heces fecales
PROCEDIMIENTO
- Solicitar los materiales
- Pesar el medio de cultivo.
- Calentar el medio hasta ebullición y hasta disolverse completamente.
- Tapar el matraz con algodón y una capucha de papel estraza
- Depositar los medios de cultivo en la autoclave durante 15 minutos a 15 lb de presión (121°).
- Después se vacían los medios en la caja de Petri y se dejan solidificar.
- Sembramos por medio radial en una sola caja del agar (muestra de orina).
- Se incuba a 37°C durante 24 horas.
- Se observa la morfología bacteriana.
- Pasadas las 24 horas procedemos a realizar tinción de Zielhl Neelsen.
- Preparamos un extendido fino del material en estudio y dejar secar al aire.
- Fijamos el material al portaobjetos, pasando el portaobjetos de 4 a 5 veces por la flama del mechero.
- Colocamos el preparado sobre el soporte de tinción y cubrimos la superficie con solución de cristal violeta.
- Luego de 1 minuto lavamos la muestra tratando de no arrastrarla.
- Cubrimos el preparado con lugol durante 1 minuto, lavar levemente con agua.
- Sostener el portaobjetos y bañamos la superficie con el decolorante alcohol-cetona hasta no arrastrar colorante.
- Lavamos con agua y cubrimos la preparación con safranina durante 1 minuto.
- Lavamos con agua corriente y dejamos secar el extendido en posición vertical.
- Observamos en el microscopio con los objetivos de 10x, 40x y 100x.
EVIDENCIAS
CONCLUSIÓN
Al finalizar esta practica aprendimos a realizar el coprocultivo por tincion Gram esta tecnica es la mas utilizada ya que clasifica los cultivos bacterianos en menos de 24 horas en gram positivas y gram negativas.
La forma de los colorantes usados en la tecnica son:
El cristal violeta se une a la pared celular bacteriana que posee la capacidad de retenerlo despues de ser lavado (bacterias gram positivas).
Las bacterias gram negativas debido a su contenido lipidico de su pared celular pierde la coloracion del cristal violeta cuando son tratadas con el colorante, en el microscopio se observan de color rojo o rosadas habiendo fijado la safranina como contracolor en su pared celular.
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