Mantenimiento y repique del microorganismo Aspergillus niger
Enviado por Ruth Araceli Ponce • 22 de Noviembre de 2023 • Ensayos • 250 Palabras (1 Páginas) • 22 Visitas
Fecha: 22/07/20
Protocolo N°1: Mantenimiento y repique del microorganismo Aspergillus niger MYA 135
Materiales y métodos
1. Microorganismo y mantenimiento
El aislamiento nativo Aspergillus niger ATCC MYA 135, conocido previamente como A. niger 419, pertenece a la colección de PROIMI (Planta Piloto de Procesos Industriales Microbiológicos). La cepa fue mantenida en glicerol al 20 % a -20º C. Para la obtención de los conidios el microorganismo fue cultivado en agar-papa-glucosado (apg) a 30º C. Los ensayos se realizan con conidios de 10 a 20 días.
2. Medio de cultivo
2.1 Medio de cultivo agar-papa- glucosado
Formula en g/l
Infusión de papa………200
Cerelosa……..……………..10
Agar………………………..…20
pH Final: 5,6 ± 0,2
2.2 Preparación
Se lavan y pelan las papar, luego se cortan en rodajas finas. Se pesan 200 g de papas y se colocan a hervir con un litro de agua deshilada durante media hora. Terminado ese tiempo se filtra con la ayuda de un embudo todo el preparado a través de una gasa. A la infusión se le adiciona 10 g de cerelosa, se fracciona y se guarda a -20 °C.
Cuando se requiera se agrega agra en polvo en una concentración de 20 g/l, se mezcla y se autoclava a 121 °C a 1 atmosfera de sobrepresión durante 15 minutos. Dejar enfriar hasta 50 °C en bisel, en frasco estériles, luego tapar los frascos con gasa y algodón. Los frascos preparados se conservan en un lugar limpio a temperatura ambiente
2.3 Almacenamiento
Medio de cultivo preparado a 2-8 °C
3. Procedimiento
3.1 Siembra
En superficie: inocular directamente la muestra
3.2 Incubación
En aerobiosis, a 30 °C durante 10 a 20 días.
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