Metodologia antioxidante
Enviado por Fernada Resendiz • 22 de Julio de 2019 • Apuntes • 406 Palabras (2 Páginas) • 65 Visitas
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FOLIN
Reactivos:
- Ácido Gálico
- Carbonato de Sodio (Na2Co3)
- Reactivo de Folin
- Se preparó ácido gálico, a 600 mg/L, aforando 3 mg de ácido gálico en 5 ml de agua desionizada, para realizar una curva de 0 a 600 mg/l
Concentración | Agua | Ácido Gálico | |
Blanco | 0 mg/L | 1 ml | 0 |
1 | 120 mg/L | .8 ml | .2 ml |
2 | 240 mg/L | .6 ml | .4 ml |
3 | 360 mg/L | .4 ml | .6 ml |
4 | 480 mg/L | .2 ml | .8 ml |
5 | 600 mg/L | 0 | 1 ml |
- Se preparó la solución de Folin en una dilución 1:10, aforando 1ml de Folin en 10 ml de agua desionizada (manteniéndolo en la obscuridad o en un envase ámbar)
- Se preparó Na2Co3 a una concentración de 7.5%, aforado .75g de Na2Co3 en 10 ml de agua desionizada
Prepara las muestras
- En un tubo de eppendorf se agrega
- 100 µl de muestra
- 500 µl de solución de Folin
- 400 µl de Na2Co3
- Se deja reposar en la obscuridad por 30 min
Lector de micro placas
- Se programa a 765 nanómetros
DPPH
Reactivos:
- DPPH
- Trolox
- Se preparó trolox, a 100 µg/ml, aforando 1 mg de trolox en 10 ml de etanol, para realizar una curva de 0 a 100 µg/ml
Concentración | Etanol | Trolox | |
Blanco | 0 µg/ml | 1 ml | 0 |
1 | 20 µg/ml | .8 ml | .2 ml |
2 | 40 µg/ml | .6 ml | .4 ml |
3 | 60 µg/ml | .4 ml | .6 ml |
4 | 80 µg/ml | .2 ml | .8 ml |
5 | 100 µg/ml | 0 | 1 ml |
- Se preparó DPPH a una concentración de 7.5%, aforando .75mg de DPPH en 10 ml de etanol (manteniéndolo en la obscuridad o en envase ámbar)
Prepara las muestras
- En un tubo de eppendorf se agrega
- 100 µl de muestra
- 900 µl de DPPH
- Se deja reposar en la obscuridad por 60 min
Lector de micro placas
- Se programa a 520 nanómetros
ABTS
Reactivos:
- ABTS
- Trolox
NOTA: Se preparó ABTS 24 horas antes, se aforo 36mg de ABTS más .006g de Persulfato de potasio en 10 ml de agua desionizada |
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