PRACTICA 3

01. Se requiere conocer el número de microorganismos de un cultivo líquido bacteriano para correr una curva de crecimiento. Dada la concentración del cultivo se tienen que realizar una serie de diluciones iniciales para lo cual se toma 1 mL del cultivo y se diluye con 9 mL de solución salina fisiológica estéril (SS), de ésta última dilución se toman 0.1 mL y se diluye con 9.9 mL de SS. Se hacen siembras por duplicado por el método de dispersión en superficie tomando volúmenes de 0.1 mL de la última dilución, utilizando placas con 25 mL de agar soya tripticasa. Después de 24 horas de incubación el promedio de la cuenta de colonias es de 219.

a) ¿Cuál es la concentración de bacterias por mL en el cultivo original?

b) ¿Tendrá efecto sobre la cuenta bacteriana la cantidad de medio en la placa? Fundamente su respuesta.

02. Se toman 5 gramos de una muestra de yogurt y se mezclan con 45 mL de agua destilada estéril. A partir de ésta solución se hacen dos diluciones sucesivas de 1:100. Se hacen siembras por duplicado por el método de dispersión en superficie tomando volúmenes de 0.1 mL de la última dilución, utilizando placas de gelosa nutritiva. Después del tiempo de incubación se cuenta el número de colonias obteniéndose los siguientes resultados: en la placa número 1 se cuentan 75 UFC y en la segunda placa 73 UFC. Calcule el número de UFC/g en el yogurt.

03. Se requiere hacer la cuantificación de microorganismos con actividad proteolítica en una muestra de suelo para lo cual toma una muestra de 10 g y lo coloca en un frasco que contiene 90 mL de agua destilada estéril. A partir de esta mezcla hace diluciones decimales hasta la dilución 10-5.

a) Haga un diagrama del procedimiento, indicando las cantidades de diluyente y de inóculo a utilizar.

b) Si se obtiene un promedio de 120 colonias en las placas inoculadas con 0.1 mL de la dilución 10-4, ¿Cuál será el número de unidades formadoras de colonias en la muestra original?

04. Analice la siguiente pregunta y escriba la respuesta correcta utilizando únicamente la información que se le proporciona. El número de Unidades Formadoras de Colonias en 10 mL de una dilución 10-2 de una muestra de agua debe ser similar al que se encuentre en ____________ mL de la muestra sin diluir.

05. Un gramo de una muestra de suelo se adiciona a un frasco que contiene 99 mL de agua destilada estéril. Se hacen cuatro diluciones decimales seriadas mas, sembrando por duplicado 0.1 mL de cada dilución en agar nutritivo para cuantificar las Bacterias Mesofílicas Aerobias (BMA). Se incuban todas las placas a 28 ºC durante 48 horas y se cuenta el número de colonias en cada una de ellas, obteniéndose los siguientes resultados:

Dilución Número de

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