PROTEINAS - PRÁCTICA N°4

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PROTEINAS - PRÁCTICA N°4

Alerson Guaza, Alexa Viafra, Nathalia Viveros

Laboratorio de Bioquímica

Facultad de Ciencias Básicas

Universidad Santiago de Cali

2022

RESUMEN

En esta práctica observamos diferentes reacciones al añadir un reactivo diferente a cada tubo de ensayo, creando la albumina para los procedimientos y solo en un tubo colocando la clara de huevo para observar la diferencia de la albumina.

Realizamos 5 pasos que fueron coagulación de una proteína, precipitación de la proteína por iones metálicos pesados, insolubilización reversible e irreversible, reacción xantoproteico y por ultimo la reacción de Biuret..

Palabras claves: Proteína, clara de huevo, albumina.

INTRODUCCION

 Las proteínas son las macromoléculas más abundantes presentes en las células vivas. Poseen una gran variedad y diversidad en cuanto a su función biológica. Son los instrumentos moleculares mediante los que se expresa la información génica. La albúmina de huevo es una compleja mezcla de proteínas que contiene todos los aminoácidos esenciales. Es utilizada como suplemento alimenticio, por sí solo o mezclado con otros componentes.

PROCEDIMIENTO

1.  Coagulación de una proteína:

Se coloco en 7 tubos de ensayo en una gradilla. (De la clara de huevo

obtenida separamos 5 ml, para el tubo, el resto se le agrego agua, se agito y se completaron con 100 ml. Luego se filtró y se hizo con esa solución todos los ensayos). Vertimos en cada tubo 3 ml de la solución de albúmina, excepto al No 1 que tenía los 5 ml de clara.

Realice lo siguiente:

  ·        Tubo 1:  Se calentó suavemente en un baño de agua, controlando la temperatura mediante un termómetro.

 . Tubo 2: Agregamos 2 ml de acetona. Dejamos en reposo y observamos.  

· Tubo 3: Se añadió 1 ml de HCl 9 N.  

·Tubo 4: Se agregó 2 ml de NaCl al 20 %.    

· Tubo 5: Añadimos 2 ml de HNO3 al 20%.  

·        Tubo 6: Se agregó4 ml de NaOH 5 M.  

Peguntas

•        Cuáles factores pueden causar la coagulación de una proteína?

Cuando una proteína se encuentra libre de componentes que la modifiquen, se reconoce su estructura como nativa; sin embargo, cuando la proteína se desnaturaliza, pierde las estructuras del orden superior (primarias, secundarias, terciarias y cuaternarias), quedando la cadena polipeptídica reducida a un polímero estadístico sin ninguna estructura tridimensional fija.

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desnaturalización y renaturalización de una proteína.

Los agentes que provocan la desnaturalización de una proteína se llaman agentes desnaturalizantes.

•        Qué explicación puede dar en cada caso?

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2.        Precipitación de la proteína por iones metálicos pesados:

Depositamos en un tubo de ensayo 3 ml de la solución de albúmina, y añadimos 1 ml de acetato de plomo.

Preguntas

•        En qué consiste la reacción observada?

La precipitación permite eliminar selectivamente la proteína de una muestra o reducir la interacción de una molécula pequeña con una proteína de unión en el plasma, como la vitamina D.

Las proteínas precipitan de sus soluciones por algunos tipos de metales pesados como cloruro de mercurio, nitrato de plata, sulfato de cobre, etc. El ion del metal pesado muy probablemente se combinan con la forma aniónica de la proteína.

•        El sulfato de cobre al ser metal pesado, actúa sobre la albúmina formando una precipitación de coloración azul, esto a causa de la presencia de Cobre en el reactivo, al haber presencia de iones metálicos se neutralizan las cargas aniónicas de los grupos esenciales de la proteína causando una precipitación debido a la desestabilización de esta. }

•        Solución de albúmina + acetato de plomo:

Se observa una coloración muy lechosa con la formación de burbujas al superior del tubo de ensayo.

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•        Qué ocurre al agregar EDTA?

Al agregar EDTA se torna transparente.

3.        Insolubilización reversible e irreversible

En un tubo de ensayo colocamos 5 ml de la solución de albúmina, agregamos en porciones pequeñas y agitando para que se disolviera bien, 2.36 g de sulfato de amonio.  

En otro tubo de ensayo, se coloco 1 ml de la solución de albúmina y añadimos1 ml de ácido tricloroacético al 50 %.  

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