Practica Coumarinas

 Objetivo: Conocer y aplicar diferentes técnicas para el aislamiento de microorganismos, así como comprender las diferencias en el crecimiento de las colonias dependiendo el tipo de medio de cultivo.

 Reactivos:

Medio Mínimo 150 ml: Medio LB:

-Macronutrientes 15 ml

-Micronutrientes 0.75 ml

-Agar 1.05 g

-Agua destilada

-Bactotriptona 1.5 g

-NaCl 1.5g

-Extracto de levadura 0.75 g

-Agar 1.05 g

 Materiales:

-4 cajas Petri

-1 mecheros

-Algodón

-Asa bacteriológica

-Papel aluminio

-Gasas

-2 Matraz Erlenmeyer

-Cultivo puro de E. coli

 Procedimiento:

1. Preparar los dos diferentes medios de cultivo siguiendo los pasos 1 a 6 de la Práctica 1.

2. Dentro de la campana de flujo laminar, encender un mechero

3. Tomar con una mano la caja de Petri y con la otra mano tomar el asa bacteriológica. Esterilizar esta última colocándola en la flama del mechero hasta el rojo vivo y enfriarla en el agar.

4. Tomar la caja que contiene el cultivo puro de E. coli y tomar con el asa una muestra de la colonia.

5. Marcar sobre el medio de cultivo con el asa bacteriológica, de acuerdo al siguiente esquema, esterilizando entre cada sección sin tomar más muestra de la colonia. Repetir con las placas de Petri restantes.

6. Colocar las cajas de Petri dentro de una estufa de incubación ajustada a 30°C durante 24 hrs.

Se espera que en la última zona sean arrastradas pocas bacterias. Esto se logra a partir de una sola bacteria y que se encuentren suficientemente aisladas las unas de las otras. Para lograr el resultado se repite todo el procedimiento con una de las colonias

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