Propagacion de hierbabuena

FASE 3:

MULTIPLICACIÓN DE LOS BROTES

Durante esta fase se espera que los explantes que sobrevivieron la FASE 1 y 2 originen brotes (de procedencia axilar) con varias hojas. En la base de cada hoja hay una yema que se desarrollará luego de ser puesta en contacto con el medio de cultivo. Periódicamente estos nuevos brotes se deben cultivar en un nuevo medio mediante divisiones y resiembras en tubos de cultivo u otros recipientes adecuados. Estas operaciones se realizan en la cámara de flujo laminar. De esta forma aumenta el número de plantas en cada repique o división de las plantas. El número de plantas que se obtiene dependerá de la especie vegetal y de las condiciones del medio de cultivo. El número de plantas que se obtuvieron fueron 43 brotes.

FASE 4:

ELECCIÓN DE UN MEDIO DE ENRAIZAMIENTO DE LOS EXPLANTES

Para enraizar los explantes se utilizan principalmente plantas individuales de un tamaño aproximado de 2 centímetros. Solo la hierbabuena llego a esta etapa ya que el alcatraz se contamino totalmente y esta enraizó en el mismo medio de cultivo donde desarrollaron yemas nuevas, por lo tanto el proceso de multiplicación y enraizamiento transcurren en forma simultánea.

FASE 5:

ACLIMATACIÓN DE LOS EXPLANTES ENRAIZADOS

Los explantes recién enraizados son muy sensibles a los cambios ambientales, de manera que el éxito o el fracaso de todo el proceso depende de la aclimatación. En esta etapa las plantas sufrirán cambios de diferente tipo que permitirán la adaptación de las mismas a vivir en condiciones naturales. En el momento en que se extraen los explantes enraizados de los frascos, están poco adaptados a crecer en un recipiente cubierto con una bolsa de plástico, ya que estos explantes han enraizado y crecido en ambientes con una humedad relativa muy elevada y generalmente tienen estomas (estructuras responsables de regular la transpiración y pérdida de agua en la planta) que no son completamente funcionales frente a descensos de la humedad relativa, y por lo tanto demasiado lentos para evitar la desecación del explante.

La siguiente lista presenta una comparación de las características de una planta en condiciones de laboratorio (in vitro) respecto a una planta en condiciones naturales (in vivo):

 In vitro

• No realiza fotosíntesis

• Crecimiento en condiciones controladas

• Crecimiento en condiciones de asepsia

• Alta humedad relativa

• Estomas no funcionales

• Ausencia de pelos radiculares

• Ausencia de cera en la cutícula

In vivo

• Realiza fotosíntesis

• Crecimiento en condiciones no controladas

• Exposición a los patógenos y gérmenes del ambiente

• Humedad relativa variable

• Estomas funcionales

• Presencia de pelos radiculares

• Presencia de cera en la cutícula

Las plantas enraizadas, deben ser aclimatadas a las condiciones de humedad del lugar disminuyendo progresivamente la humedad relativa e incrementando progresivamente la intensidad de luz hasta llegar a un punto en que se pueda retirar la bolsa completamente. La elección de un sustrato con buenas características físicas, es clave para el éxito de esta etapa. Para el trasplante, elegimos tierra suelta, para permitir un desarrollo y crecimiento de raíces muy rápido.

Todos los días se debe controlar el nivel de humedad en los recipientes. Si es necesario, se aplica un riego manual, para mantener un ambiente húmedo. Cada tres días se debe de airear las plantas y a los 15 días del trasplante, se puede comenzar a retirar la bolsa de plástico poco a poco.

Las condiciones del cultivo in vitro, generan cambios en algunos aspectos anatómicos y fisiológicos de las plantas, por esta causa, durante la aclimatación, los cambios deben ser muy graduales, para minimizar el estrés y tener mayor tasa de sobrevivencia.

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