Prototipo de un biosensor para medir niveles de nitritos presentes en embutidos

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Actividad

Biotecnología ambiental

Hernández Lazo Edgar

Prototipo de un biosensor para medir niveles de nitritos presentes en embutidos.

16/10/22

Fundamento

El modelo de este biosensor se basará en el uso de enzimas nitrito oxidorreductasa (NXR) (2). la cual es una molibdoproteína de hierro-azufre asociada a la membrana, y forma parte de una cadena de transferencia de electrones que canaliza electrones desde el nitrito hasta el oxígeno molecular, esta enzima se encuentra presente en las bacterias nitrospinas, el cual se planea implementar para medir los niveles de nitritos presentes en los embutidos que se venden comercialmente

Prototipo;

• Compuesto por un sensor biológico (cultivo de las nitrospinas y aislamiento de la enzima oxidorreductasa)
• Transductor: que traducirá la señal que emita el sensor del bioreceptor mediante señales electroquímicas
• Detector: detectara las señales electroactivas mediante la reacción ocurrida

Materiales y métodos;

Elaboración del biotest:

• En primera instancia debe realizarse el cultivo de las bacterias en un medio solido diferenciado, una vez hecho eso se realizará el traspaso a un medio de cultivo líquido para la proliferación  
• Una vez proliferado, deberá centrifugarse para obtenerse las células separadas del medio liquido
• Realizar la ruptura de las membranas bacterianas con técnicas de ultrasonidos, choque osmótico o mediante trituración mecánica
• Aislar la enzima de interés de las demás proteínas circundantes de las bacterias mediante una purificación
• Hacer uso de un colector de fracciones los cuales permiten la recolección de fracciones en un determinado tiempo y volumen durante los procesos de cromatografía, de esta manera evitamos la contaminación por otras proteínas que no sean de nuestro interés.
• Conservas las enzimas en hielo para mantener la actividad

Electrodo: podría ser fabricado con una barra de acero rodeada con plástico y añadir una capa de plata u oro dependiendo el nivel de conductividad que poseen los metales, aquí mismo se tendria que inmovilizar la enzima mediante absorcion .

Mientras la reacción de oxidación ocurra se generarán electrones que harán un cambio de corriente por lo que será medible la cantidad de nitritos presentes en la muestra que se utilice

Biosensor: hacer un diseño para ensamblar el biosensor de manera que encaje el bioreceptor enzimático y sus demás componentes (hardware)., este bioreceptor se encargará de detectar el analito de interés, de modo que sea selectivo.

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