Separación de aminoácidos utilizando la técnica de cromatografía
Enviado por Demian Alexis Acevedo • 6 de Noviembre de 2015 • Tareas • 515 Palabras (3 Páginas) • 732 Visitas
Resultados
Durante la sesión de laboratorio se llevó a cabo una separación de aminoácidos utilizando la técnica de cromatografía en capa fina (CCF) para lo cual se utilizaron estándares de glicina, arginina, histidina, alanina, leucina y acido glutámico, además de los reactivos n-propanol:NH4OH 34% (7:3) y n-butanol: Acido acético glacial: Agua (6:2:2) como fases móviles 1 y 2 respectivamente. Finalmente fue utilizada anhidrina como revelador de las placas cromatografías.
Para el procedimiento se sembró la muestra problema (M.P) en una placa cromatografica de gel de sílice, junto con los estándares antes mencionados y se eluyeron utilizando las fases móviles antes mencionadas, resultando lo siguiente:
Figuras 1 y 2.- Placas cromatograficas reveladas, eluidas con Fase móvil 1.
[pic 1] [pic 2]
Tabla 1 .- Distancias recorridas por las manchas y el solvente utilizando fase móvil 1
N° | Estandar | Recorrido de la mancha (cm) | Frente del solvente (cm) | Rf |
1 | Glicina | 2,7 | 7,7 | 0.35 |
2 | Arginina | 1,2 | 7,7 | 0.16 |
3 | Histidina | 3,5 | 7,7 | 0.45 |
4 | Alanina | 3,5 | 7,5 | 0.46 |
5 | Leucina | 4,5 | 7,5 | 0.6 |
6 | Ac. Glutamico | 2,1 | 7,5 | 0.28 |
M.P | ----------- | 3,5 | 7,5 | 0.46 (1) |
M.P | ----------- | 4,5 | 7,5 | 0.6 (2) |
Figuras 3 y 4.- Placas cromatografías reveladas, eluidas con fase móvil 2.
[pic 3] [pic 4]
Tabla 2.- Distancias recorridas por las manchas y el solvente utilizando fase móvil 2
N° | Estandar | Recorrido de la mancha (cm) | Frente del solvente (cm) | Rf |
1 | Glicina | 1,9 | 5,7 | 0.33 |
2 | Arginina | 1,0 | 5,7 | 0.17 |
3 | Histidina | 0,7 | 5,7 | 0.12 |
4 | Alanina | 2,3 | 5,8 | 0.39 |
5 | Leucina | 3,9 | 5,8 | 0.67 |
6 | Ac. Glutamico | 2,4 | 5,8 | 0.41 |
M.P | ----------- | 2,3 | 5,8 | 0.39(1) |
M.P | ----------- | 3,9 | 5,8 | 0.67(2) |
Lo cálculos de Rf se realizaron mediante la aplicación de la formula:
Rf= Recorrido de la mancha (cm) / Frente del solvente (cm)
Por ejemplo para la glicina usando fase móvil 2 seria
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