Tecnicas De Preparacion Histologicas

TÉCNICAS DE PREPARACIÓN HISTOLÓGICAS.

Se denomina técnica histológica a todo aquel conjunto de procedimientos aplicados a un material biológico con la finalidad de conferirle las condiciones óptimas para observar, examinar y analizar sus componentes morfológicos a través del microscopio óptico o electrónico.

Se pueden distinguir dos tipos de procedimientos: Inmediatos o vitales: en los que la muestra a observar se encuentra en el mismo líquido de su hábitat (linfa, suero sanguíneo, agua de estanque, etc), o bien, en algún medio que lo reemplace (solución salina balanceada). Así, es posible observar las células aún vivas, como protozoos, células descamadas o disociadas, estructuras delgadas o translúcidas, sin necesidad de tinciones (observación al estado fresco); hay casos en que la observación de alguna estructura celular específica se facilita con colorantes inocuos para las células, sin modificar su estructura o función (coloración vital).algunos ejemplos de estos colorantes son: tinta china, carmín de litio, azul tripan, verde de Jano, rojo neutro, azul de metileno o naranja de acridina.

•Mediatos o postvitales: permiten observar células de seres vivos que han detenido sus procesos vitales y esnecesario conservar su estructura. Para esto es necesario seguir varios pasos:

Toma de muestra: biopsia (muestra de tejido u órgano de un ser vivo) o necropsia (obtener muestras

a partir de un individuo muerto).

Fijación: su fin es dar termino a la vida de las células impidiendo cualquier modificación postmortem

(procesos autolíticos), manteniendo así la forma de los tejidos sin cambios notables en ellos. Para esto

es necesario aplicar fijadores que se clasifican en dos grupos: OXIDANTES (ácido ósmico, ácido

crómico, ácido acético, entre otros) y REDUCTORES (formaldehído, glutaraldehído, alcohol

metílico, entre otros). Un fijador debe ser fácil de conseguir y manipular, no debe disolver

componentes celulares, debe dar cierta dureza a los tejidos sin llegar al punto de hacerlos quebradizos

y debe ser de bajo costo económico.

Inclusión: corresponde a la formación de un bloque de parafina con la muestra en su interior. Para

esto es necesario que la muestra se deshidrate en baños sucesivos de alcohol etílico de distinta

concentración (en forma ascendente); luego se aplica algún líquido diafanizador como el xilol

(aclaración) y finalmente se forma el bloque de parafina sólida con la muestra en el interior, formando

un bloque que posteriormente se secciona para obtener las muestras.

•Obtención del corte: a través del micrótomo, instrumentos mecánicos que permiten obtener cortes de

un grosor uniforme a partir del bloque de parafina con la muestra incluida. Los cortes van siendo

colocados en el portaobjetos facilitando esto con una gota de agua que recibe el corte.

Coloración o tinción: permite que una estructura celular o tisular adquiera una coloración específica.

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