Enzimas
Enviado por Elena Corbalán Córdoba • 4 de Mayo de 2023 • Informes • 762 Palabras (4 Páginas) • 27 Visitas
Elena Córdoba
Trabajo practico N° 2:
ENZIMAS
OBJETIVO GENERAL: Realizar un estudio enzimático parcial de la invertasa empleando como sustrato la sacarosa.
REACCION CATALIZADA POR LA INVERTASA:
[pic 1]
OBJETIVOS ESPECIFICOS:
- Curva de calibrado empleando como estándar glucosa.
Tubo N° | DO | DOT1-6-DObco | µmoles de glucosa |
B | 0,008 | 0 | 0 |
1 | 0,043 | 0,035 | 0,05 |
3 | 0,329 | 0,321 | 0,30 |
4 | 0,526 | 0,521 | 0,50 |
5 | 0,700 | 0,692 | 0,70 |
6 | 0,920 | 0,912 | 0,90 |
Observación: excluimos el testigo N° 2 por presentar poca concordancia con las absorbancias de los demás testigos.
Cálculos:
1 µmoles de glucosa 1mL[pic 2]
0,05 µmoles de glucosa=X 0,05ml 1er testigo[pic 3]
1 µmoles de glucosa 1mL[pic 4]
0,15 µmoles de glucosa=X 0,15ml 2do testigo[pic 5]
Y así para los demás testigos…
- Determinación del efecto de la temperatura sobre la actividad catalítica de la invertasa.
Cálculos
5 min 0,22 umol [pic 6]
1 min X= 0,04 µmoles azúcares reduct./min[pic 7]
Mismo cálculo para los demás
T (°C) | Tubo N° | DO | DOT1-6-DObco | µmoles azúcares reduct./5min | Diferencia µmoles azúcares reduct./5min | µmoles azúcares reduct./min |
0 | B1 | 0,062 | 0,054 | 0,07 | 0,22 | 0,04 |
1 | 0,285 | 0,277 | 0,29 | |||
25 | B2 | 0,141 | 0,133 | 0,14 | 0,19 | 0,03 |
2 | 0,343 | 0,335 | 0,33 | |||
37 | B3 | 0,083 | 0,075 | 0,09 | 0,50 | 0,10 |
3 | 0,601 | 0,593 | 0,59 | |||
55 | B4 | 0,121 | 0,113 | 0,13 | 0,67 | 0,13 |
4 | 0,820 | 0,812 | 0,80 | |||
100 | B5 | 0,214 | 0,206 | 0,21 | 0,04 | 0,008 |
5 | 0,249 | 0,241 | 0,25 |
Grafica del efecto de la temperatura sobre la cinética enzimática de la invertasa.
Conclusión: La temperatura óptima es a 55°C ya que a esa T la reacción se lleva a cabo con mayor velocidad enzimática por minuto. En las demás T se observa un declive propio de la desactivación de la enzima
- Determinación del Km de la invertasa en ausencia y presencia del inhibidor anilina
Sin inhibidor Tubo N° | DO | DOT1-6-DObco | µmoles azúcares reduct./5min | µmoles azúcares reduct./min | 1/V | [S] | 1/[S] |
B | 0.019 | 0 | |||||
1 | 0.206 | 0.187 | 0.19 | 0.038 | 26.31 | 0.022 | 45 |
2 | 0.233 | 0.214 | 0.22 | 0.044 | 22.73 | 0.033 | 30 |
3 | 0.263 | 0.244 | 0.24 | 0.048 | 20.83 | 0.055 | 18 |
4 | 0.460 | 0.441 | 0.44 | 0.088 | 11.36 | 0.077 | 12.86 |
5 | 0.588 | 0.569 | 0.57 | 0.114 | 8.77 | 0.088 | 11.25 |
Observación: se excluyó el sexto testigo por presentar poca concordancia con los demás ya que su absorbancia era 0.463 y no cumple la ley de beer (error en la medida).
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