DETERMINACIÓN ESPECTROFOTOMÉTRICA DE LA CLOROFILA EN EL ANÁLISIS DEL AGUA

DETERMINACIÓN ESPECTROFOTOMÉTRICA DE LA CLOROFILA EN EL ANÁLISIS DEL AGUA

Introducción

La determinación de la clorofila es un parámetro que nos puede indicar la calidad del agua en cuanto a la concentración de fitoplancton (algas microscópicas). Este parámetro aporta informaciones sobre la cantidad de biomasa presente en el medio acuático analizado, y a su vez nos puede suministrar una

Las tres clorofilas generalmente encontradas en el fitoplancton son clorofila a, b y c. La clorofila viene a ser del orden del 1 al 2 % del peso seco de las algas planctónicas

La clorofila es una molécula compleja que posee un átomo de magnesio en el centro, mantenido por un anillo de porfirinas

Una molécula de clorofila se compone de una cabeza y una cola. La cabeza contiene cuatro anillos de carbono \ nitrógeno unidos formando un anillo mayor en el centro de este anillo hay un átomo de magnesio y tiene un pigmento color verde con estructuras policiclicas planas. La cola es una cadena de carbonos enlazados unidos a la cabeza.

La clorofila puede detectarse fácilmente gracias a su comportamiento frente a la luz. La medición óptica de la concentración de clorofila en una muestra de agua permite una estimación suficiente de la concentración de fitoplancton (algas microscópicas) e, indirectamente, de la actividad biológica; de esta manera la medición de clorofila es un instrumento importante de vigilancia de los procesos de eutrofización.

Para su determinación, una vez concentrado el plancton mediante filtración, se extraen los pigmentos con acetona acuosa o metanol y se determina la densidad óptica (absorbancia) del extracto en un espectrofotómetro a 664, 647 y 630 nm. Por otra parte se hace una corrección de la turbidez haciendo una lectura de absorbancia a 750 nm.

Determinación de clorofila-a en muestras de mar en la columna de agua, empleando el método fluorométrico de Yentsch y Menzel 1963 & Holm Hansen et.al 1965

Procedimiento Experimental

Recoger una muestra de 1 L de agua de mar en 1 frasco de polietileno limpio y estéril. Las muestras de Clorofila-a se filtran usando microfiltros de fibra de vidrio (Whatman GF/F - 0,75 µm) y se congelan hasta su posterior análisis.

Una vez descongeladas las muestras de Clorofila-a, se toma con sumo cuidado y se tritura en un mortero hasta hacerlo polvo y se coloca en un tubo de ensayo con tapa/rosca. Añadiéndole 10 mL de acetona al 90 %. Seguidamente se tapa el tubo y en caso de ser necesario se cubre con papel aluminio y se agita con mucho cuidado el tubo durante 1 minuto.

Guardar el tubo con el extracto en el refrigerador durante 24 horas en oscuridad para

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