DETERMINACION DE COLIFORMES POR EL METODO DEL NMP EN SALCHICHA

PRACTICA 4

DETERMINACION DE COLIFORMES POR EL METODO DEL NMP EN SALCHICHA

COLEGIO DE ESTUDIOS CIENTIFICOS Y TECNOLOGICOS DEL ESTADO DE MICHOACAN PLANTEL 05 GUACAMAYAS

TÉCNICO EN ANÁLISIS Y TECNOLOGÍA DE LOS ALIMENTOS

MOD 3. SUB III ANALISIS MICROBIOLÓGICOS A CÁRNICOS Y SUS DERIVADOS

PRÁCTICA 4: DETERMINACION DE COLIFORMES POR EL METODO DE NMP EN SALCHICHA

IRENE NÚÑEZ AYALA

ALIMENTOS 403-C

IBQ. MARÍA ELIZABETH PEÑA SÁNCHEZ

EQUIPO 2:

JOSELYN OLMEDO GONZALES

JENIFER MORALES BALANZZAR

BLANCA YARELI HERNANDEZ JIMENEZ

FRANCISCO DE GUADALUPE FLORES REYES

IRENE NÚÑEZ AYALA

FECHA DE ENTREGA: 17 DE JUNIO DEL 2013

INTRODUCCION

La determinación de microorganismos coliformes totales por el método del Número más Probable (NMP), se fundamenta en la capacidad de este grupo microbiano de fermentar la lactosa con producción de ácido y gas al incubarlos a 35°C  1C durante 48 h., utilizando un medio de cultivo que contenga sales biliares. Esta determinación consta de dos fases, la fase presuntiva y la fase confirmativa. En la fase presuntiva el medio de cultivo que se utiliza es el caldo lauril sulfato de sodio el cual permite la recuperación de los microorganismos dañados que se encuentren presentes en la muestra y que sean capaces de utilizar a la lactosa como fuente de carbono. Durante la fase confirmativa se emplea como medio de cultivo caldo lactosado bilis verde brillante el cual es selectivo y solo permite el desarrollo de aquellos microorganismos capaces de tolerar

tanto las sales biliares como el verde brillante.

La determinación del número más probable de microorganismos coliformes fecales se realiza a partir de los tubos positivos de la prueba presuntiva y se fundamenta en la capacidad de las bacterias para fermentar la lactosa y producir gas cuando son incubados a una temperatura de 44.5  0.1C por un periodo de 24 a 48 h.

OBJETIVO

El objetivo de esta practica aprender, comprender y realizar de manera correcta esta técnica para determinar coliformes presentes en salchicha.

MATERIALES

Muestra de salchicha Matraz erlemeyer 250ml Mechero de bunsen

Vaso de cultivo esteril Pipetas de 1ml Tripie

Espatula Pipetas de 10 ml Agar caldo lauril sulfato de sodio

Tubos de ensayo Solucion madre gradilla

PROCEDIMIENTO

 Lavar el área de trabajo con jabón y lavar el material.

 Preparar el agar 3.56 en 10 ml. Calentarlo.

 Agregarle el agar a los tubos con rocas Agregarle 10 ml de agar.

 Agregarle a los tubos grandes 20 ml de agar.

 Luego poner las campanas llenas de agar sin ninguna burbuja y tapar los tubos con tapones.

 Luego esterilizar.

 Triturar la muestra en el mortero, solo 10g de salchicha.

 Agregarlo al vaso de cultivo y agregarle 90ml de solución madre

Y 9ml a dos tubos de rosca.

 Hacer las diluciones de 1:10, 1:100 y 1:1000.

 Luego Sembrar inocular 1ml a los tubos de rosca .

 Inocular con 10ml de muestra a los tubos grandes. Incubar a 35°C-24 hrs.

RESULTADOS

Tubos grandes

1:10 Falso positivo

1:100 NEGATIVO

Tubos de rosca (tubos al doble)

1:10 Negativo

1:100 Negativo

CONCUSIONES:

Concluiremos pues que para esta práctica para ver los resultados se revisan los tubos de ensayo y se observan las campanas al interior

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