RESULTADOS DE COAGULACION DE PROTEINAS

PRACTICA DE BIOQUIMICA: IDENTIFICACIÓN DE PROTEINAS

1. COAGULACIÓN DE LAS PROTEÍNAS

FUNDAMENTO

Las proteínas debido al gran tamaño de sus moléculas forman con el agua soluciones coloidales que pueden precipitar formándose coágulos al ser calentadas a temperaturas superiores a 70ºC o al ser tratadas con soluciones salinas, ácidos, alcohol, etc.

La coagulación de las proteínas es un proceso irreversible y se debe a su desnaturalización por los agentes indicados que al actuar sobre la proteína la desordenan por destrucción de sus estructuras secundaria y terciaria.

PROCEDIMIENTO

1. Colocar en tres tubos de ensayo una pequeña cantidad de clara de huevo (puede diluirse en un poco de agua para obtener una mezcla espesa) o 2-3ml de leche.

2. Calentar uno de los tubos al baño María, añadir a otro 2-3ml de HCl concentrado y al tercero 2 o 3ml de alcohol etílico.

3. Observar los resultados.

2. ADICION DE SACAROSA.

PROCEDIMIENTO:

1. Rotule dos tubos de ensayo con la letra A y B.

2. En el tubo A coloque 5 mL de clara de huevo y 3 mL de la mezcla de sacarosa preparada al 50% p/v. Introduzca dicho tubo en un baño de agua y caliente con ayuda de la plancha de calentamiento.

3. En el tubo de ensayo B coloque 5 mL de clara de huevo y 3 mL de agua destilada. (Usar como testigo)

4. Introduzca ambos tubos en el baño de agua preparado en un beaker de 250 mL coloque 100mL de agua y llévelo a la plancha de calentamiento hasta alcanzar 40°C aproximadamente

5. Sujete un termómetro dentro cada tubo de ensayo y anote la temperatura en la cual la albúmina de huevo se torna opaca, es decir, se coagula.

6. Anote sus observaciones y discuta sus resultados.

3: FACTOR pH.

PROCEDIMIENTO:

1. Rotule tres tubos de ensayo con la letra A, B y C.

2. Coloque en los tubos lo siguiente:

Tubo A: 5 mL de yema de huevo y mida su pH.

Tubo B: 5mL de yema de huevo y 2ml. de limón, mida el pH.

Tubo C: 5mL de yema de huevo y 2mL solución de bicarbonato de sodio, mida el pH.

3. Introduzca ambos tubos en el baño de agua preparado en el paso 1 del experimento anterior

4. Sujete un termómetro dentro cada tubo de ensayo y anote la temperatura en la cual la yema de huevo se torna opaca, es decir, se coagula.

5. Anote las observaciones respecto a cada tubo considerando el cambio de la temperatura de coagulación a diferentes pH y discuta sus resultados.

4. PRUEBA DE BIURET

Fundamento:

La prueba de Biuret sirve para identificar cadenas polipeptídicas de más de tres residuos de aminoácidos. El cobre del reactivo de Biuret interacciona con los electrones libres de los átomos de nitrógeno de los aminoácidos dando un compuesto de color característico.

PROCEDIMIENTO:

1. Preprare 3 tubos de ensayo y colocar en cada tubo 2 ml de diferentes soluciones proteicas.

2. Añadir en cada tubo 2ml de disolución de hidróxido sódico. Agitar y dejar caer cuatro o cinco gotas de una solución al 1% de sulfato de cobre.

3. Ver los resultados.

5 PRUEBA DE LA DESNATURALIZACIÓN DE LA CASEINA

Materiales:

• Dos vasos con un fondo de leche a temperatura ambiente

• Un poco de vinagre

• Medio limón

PROCEDIMIENTO

1. Añade el vinagre a uno de los vasos

2. Exprime el limón en el otro

3. Agita ambos vasos para que se mezclen sus contenidos

4. Espera unos minutos

Observa lo que sucede en cada uno de los vasos

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