La Necrosis

dicho de otro modo, la presión osmótica es la fuerza de atracción que ejercen las partículas sobre el agua atrayéndola .La osmolaridad depende del número de partículas que se encuentran es solución .La Unidades de Osmolaridad son el Osmol /Kg H2O , en medicina usamos el sub múltiplo miliOsmol /Kg H20

Un Osmol por Kg es la fuerza para atraer agua que ejerce un MOL de partículas que se encuentran en 1 Litro ó Kg de solución. Cada partícula (átomo) ejerce una presión osmótica independientemente; por ejemplo un mol de glucosa disuelto en un Kg (litro ) de agua ejerce una presión osmótica de 1 Osmol /kg agua; en cambio un mol de ClNa disuelto en un litro de agua ejercerá una presión Osmótica de dos Osmoles debido a las dos partículas en que se disocia, una de sodio y otra de cloro. (Na+ y Cl- )

La capacidad de una partícula para producir un flujo de agua a través de la membrana celular se llama tonicidad.

Una solución extracelular que permite que el agua fluya hacia dentro de la célula haciendo que ésta se hinche se llama hipotónica (Hipo osmolar)

Una solución que permite que el agua fluya hacia fuera de la célula se llama hipertónica. (Hiper osmolar)

La membrana del glóbulo rojo nos servirá en la presente práctica para demostrar este fenómeno y asimismo demostrar que la membrana tiene ciertos límites de resistencia normales a variaciones de la tonicidad en el medio interno.

Aplicación clínica.

Existen algunas enfermedades en las cuales se producen alteraciones en la membrana que generan hemólisis por mayor fragilidad de la membrana , son defectos genéticos heterogéneos que afectan a las proteínas constitutivas de la membrana del eritrocito .La Enfermedad Esferocitosis es una de ellas, en la en la cual se ha demostrado una disminución de la proteína membranal Espectrina del hematíe, y el grado de déficit de la proteína Espectrina parece asociarse con la gravedad clínica de esta enfermedad, pues los hematíes son muy frágiles y se hemolizan produciendo anemia intensa.

Fundamento

Se llama resistencia globular osmótica a la que presentan los hematíes suspendidos en soluciones salinas hipotónicas. Si empleamos soluciones salinas de 0.76 a 0.9 % y suspendemos dentro de ellas los hematíes veremos que éstos se conservan sin alteración durante varias horas, y que una vez sedimentados (espontáneamente o por centrifugan), el líquido que sobrenada es claro y transparente como la misma solución salina. Pero si efectuamos suspensiones de hematíes en soluciones de cloruro sódico a concentraciones progresivamente decrecientes observaremos que al llegar a una determinada concentración empiezan a destruirse ,liberándose la Hb, lo que confiere al líquido una ligera coloración rojiza que no desaparece por centrifugación .E esto se le llama hemólisis inicial o resistencia mínima, que normalmente se presenta entre las concentraciones de 0.46 y 0.42 %.Esta hemólisis de los hematíes va

aumentando en cantidad a medida que la solución de cloruro sódico va siendo mas hipotónica hasta presentarse una hemólisis total. Esta hemólisis total se observa entre las concentraciones de 0.34 a 0.30 %

Esta práctica sirve para determinar la resistencia de la membrana de los glóbulos rojos a la hemólisis en presencia de diferentes concentraciones de soluciones salinas hipotónicas a temperatura ambiente y veremos en cuál de ellas se presenta hemólisis inicial y total.

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Reacivos y Equipos Necesarios

1.-Solución salina al 0.75 %

2.-Pipetas graduadas: 1 ml al 0.01

10 ml al 0.1

5 ml al 0.1

3.- Micropipetas de 0.1 ml

4.- Fiola de 100 ml

5.- Espectrofotómetro

6.- Muestra de sangre venosa desfibrinada ó hematíes lavados.

7.- Agua destilada

8.- Tubos de vidrio 13x 100 mm sin reborde

Metodo

1.- Preparar soluciones seriadas, en tubos de prueba marcados del 1 al 11, según la tabla adjunta, haciendo las diluciones con agua destilada según lo indicado:

Marcar 19 tubos de prueba y repartir así:

Tubos

Nº

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