Biomoleculas

Bioquímica

PROTEINAS Y AMINOÁCIDOS

Aislar Caseína a Partir de la Leche

INTRODUCCION:

El proposito de este experimento es asilar una proteína (caseína) de una fuente natural

(leche) y demostrar que el producto obtenido es en sí una proteína llevando a cabo una

serie de pruebas a su producto Favor de repasar la estructura y la química de proteínas en

su libro de texto.

TEORIA

Solubilidad de las proteínas: Las proteínas son macromoléculas que son solubles

(¿suspendidas?) en agua. Las proteínas son menos soluble en agua cuando están en su

punto isoeléctrico y son más solubles a valores de pH más altos o bajos. La solubilidad a

valores de pH’s diferentes al punto isoeléctrico aparenta deberse a un exceso de grupos

catiónicos o aniónicos expuestos en la superficie de la proteína. Si la proteína está

negativamente cargada a pH mayores de su punto isoeléctrico, cuando dos proteínas

chocan una con la otra las cargas negativas se repelen y no se aglomeran como se

esperaría de moléculas grandes. Sin embargo, en el punto isoeléctrico de la proteína no

existe carga neta. Cuando un extremo negativo de una proteína se encuentra de frente con

el extremo positivo de otra proteína, la atracción electroestática causa que las dos

proteínas se peguen. Otras proteínas tropiezan con el dímero y se unen al grupo.

Eventualmente, un número grande de proteínas formaran un agregado tal, que la proteína

precipita. En este experimento, caseína (pI = 4.6) se precipitará a partir de la leche (pH ≈

7) por adición de ácido acético glacial.

Prueba Biuret: La prueba Biuret es una prueba general para proteínas, no

especifica. Cuando una proteína reacciona con sulfato de cobre (II) (color azul) se

forma como respuesta positiva un complejo color violeta.

(p.5.) RECONOCIMIENTO DEL PODER REDUCTOR DE LOS MONOSACÁRIDOS

Los monosacáridos tienen poder reductor porque su grupo carbonilo (C=O) se puede oxidar a ácido (COOH), a costa de reducir a otros compuestos. Esto se pone de manifiesto con la reacción de Fehling en la que una solución de sulfato de cobre de color azul (reactivo de Fehling) se transforma en óxido cuproso de color rojo ladrillo.

Los disacáridos como la sacarosa, al no tener un carbono anomérico libre, carecen de poder reductor; sin embargo, si se hidroliza la sacarosa con ácido clorhídrico y calor, se separa la glucosa de la fructosa; estos monosacáridos sí tienen poder reductor.

(p.6.) RECONOCIMIENTO E HIDRÓLISIS DEL ALMIDÓN

El almidón es un polisacárido de reserva en células vegetales. Para reconocerlo se utiliza la solución del Lugol, (yodo y yoduro potásico en medio ácido). Al añadir tal solución el almidón adquiere una coloración oscura, azul-violeta. Esta coloración no es debida a ninguna reacción química sino a que el Lugol se adsorbe a la superficie del almidón, de forma que si lo calentamos se separan y la coloración desaparece.

El almidón, cuando se hidroliza libera amilosa y amilopeptina, si la hidrólisis prosigue se van liberando oligosacáridos de glucosa y finalmente glucosas.

) RECONOCIMIENTO DE LÍPIDOS Y ESTUDIO DE SUS PROPIEDADES

*Los lípidos más abundantes son los que posen ácidos grasos, es decir , los lípidos saponificables. De ellos los trigliceridos ( grasas y aceites) son los más característicos. En los triglicéridos una molécula de glicerina se encuentra esterificada por tres moléculas de ácidos grasos. La reacción de formación será la siguiente:

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