CLOSTRIDIUM

1. INTRODUCCION

El género Clostridium está formado por un grupo heterogéneo de bacilo gran positivos anaerobios esporulados. Está ampliamente distribuido en la naturaleza, principalmente en el suelo y en el tracto intestinal de muchas especies animales incluido el hombre, y puede causar infecciones de origen exógeno y de origen endógeno. En la actualidad se han descrito más de 150 especies, aunque sólo alrededor de 30 han sido asociadas con infección humana, siendo Clostridium perfringens la especie más frecuente.

Muchas especies del género Clostridium tienen capacidad de producir potentes exotoxinas que son las responsables de ocasionar graves cuadros tóxicos. Esta clase de microorganismos presenta un gran potencial de peligro para el consumidor que ingiera un producto contaminado, ya que es muy propenso a infección en la piel y tejidos blandos, Bacteriemia, Biliares, tracto genital, y demás vistas en la actualidad. Por esta razón la importancia de un análisis microbiológico de recuento de Clostridium en los alimentos destinados para el consumo humano.

2. OBJETIVOS

2.1. Llevar a cabo el aislamiento y desarrollo de los microorganismos pertenecientes a la especie Clostridium.

2.2. Determinar la carga de microorganismos anaerobios (Clostridium) en las plantas donde se lleva a cabo el procesamiento y/o producción de alimentos.

2.3. Comprobar el recuento, presencia y/o ausencia de microorganismos anaerobios (Clostridium).

3. MATERIALES Y METODOS

3.1. Materiales

• Agar OSPSP (15g.)

• Agua Destilada

• Agua peptonada

• Cajas Petri

• Erlenmeyer

• Tubos de ensayo

• Micropipeta

• Probeta

• Suplemento

3.2. Métodos

Dilución: Mezcla del inoculo con el diluyente.

Diluyente: Solución que no inhibe ni hace crecer los organismos vehículo. Agua pectonada.

Cálculos agua peptonada:

8.5 NaCl  1000ml 1 peptona  100ml

X  115ml X 115ml

X= 0.97 g a lo que dejamos por 1g de NaCl. X= 0.12 g de peptona

Cálculos de medio:

OSPSP

1 caja 20 ml 22,8g 500ml

6 cajas  X 0 120ml

X= 120ml X= 5.47 g de OSPSP

Suplemento

2g 500ml

X 120ml

X= 0.48g

Prueba Presuntiva

• Disolver el medio

• Esterilizar en el autoclave durante 20 minutos a 120ºC.

• Enfriar el medio a 47ºC.

TECNICA.

1. Depositar cantidades de 1 ml, por duplicado, de las diluciones adecuadas del alimento en tubos estériles.

2. Añadir a continuación 10 ml de medio enfriado a aprox. a 47ºC.

3. Una vez solidificado el agar, incubar los cultivos en baño de agua a 46º C. durante

16-18 horas.

4. Posterior al tiempo de incubación, contar las colonias negras.

LECTURA DE RESULTADOS

Esta prueba permite determinar la presencia de este microorganismo anaerobios en el lugar donde se procesan o se fabrican alimentos, dado que en la industria alimentaria juega un papel perjudicial ya que las esporas de esta bacteria es termo resistente y puede sobrevivir a periodos de calor intenso incluso durante

...