Carbohidratos

IDENTIFICACION Y CUANTIFICACION DE CARBOHIDRATOS

OBJETIVO:

Diferenciar las sustancias que contienen carbohidratos simples por medio de sus reacciones químicas.

La diversidad de sus orígenes y la gran variabilidad en su composición química, han surgido una variedad enorme de métodos de análisis de carbohidratos, ya sean dichos métodos: físicos, químicos y bioquímicos.

Métodos Fisicos:

Cromatografía en papel

Cromatografía en capa fina

Cromatografía gas-liquido

Cromatografía de intercambio ionico

Electroferesis

Espectrocopia de Rayos Infrarojos

Métodos Quimicos

Los basados en reacciones que dan origen a compuestos coloreados

Capacidad reductora

Capacidad de formar complejos coloreados con el yodo

Métodos Bioquimicos

Microbiológicos: se basan en la capacidad de cierta cepas de levaduras de fermentar específicamente algunos grupos de azucares, dichas levaduras son especialmente útiles a la hora de diferenciar entre pentosas y hexosas, incluyendo también sus polímeros.

Enzimaticos: estos incluyen los análisis de monosacáridos, oligosacáridos y polisacáridos

Entre los métodos cualitativos basados en las propiedades físicas de los carbohidratos están las cromatografías en papel y capa fina, la cromatografía gas-líquido, la de intercambio iónico, la electroforesis, la refractometría, la hidrometría, la polarimetría y la espectroscopia de rayos infrarrojos.

Por otro lado, entre los métodos químicos están los basados en reacciones que dan origen a compuestos coloreados, tales como las que se dan después de tratar los monosacáridos con ácido mineral fuerte y hacer reaccionar el furfural o hidroxifurfural formado, con compuestos orgánicos tales como fenoles, aminas aromáticas, urea y antrona.

De la misma forma, también se hace uso de su capacidad reductora, haciéndolos reaccionar con sales de metales como el cobre, hierro, yodo, plata y cerio. Por último, también es posible su análisis basándose en la capacidad de formar complejos coloreados con el yodo, tal como sucede con el almidón.

En relación con los métodos bioquímicos de análisis de carbohidratos, estos pueden ser microbiológicos o emzimáticos. Los primeros se basan en la capacidad de ciertas cepas de lavaduras de fermentar específicamente algunos grupos de azúcares; dichas levaduras son especialmente útiles a la hora de diferenciar entre pentosas y hexosas, incluyendo los polímeros de ambas.

Con respecto a los métodos enzimáticos, estos incluyen los análisis de monosacáridos, oligosacáridos y polisacáridos. En el caso de los dos últimos, el análisis incluye la hidrólisis enzimática de los enlaces glicosídicos.

REACCION DE MOLISCH

Este ensayo permite detectar la presencia de hidratos de carbono en una

muestra; se basa en la acción hidrolizante y deshidratante que ejerce el ácido

sulfúrico sobre estos compuestos. Como se sabe, los ácidos concentrados

originan una deshidratación de los azúcares para rendir furfurales, que son

derivados aldehídicos del furano. Los furfurales se condensan con los fenoles

para dar productos coloreados característicos, empleados frecuentemente en

el análisis colorimétrico.

REACCION DE FEHLING

Este ensayo pone de manifiesto la presencia de azucares reductores

(aldosas: glucosa, ribosa, eritrosa, etc.). Se trata de una reacción redox en la

que el grupo aldehído (reductor) de los azúcares es oxidado a grupo ácido por

el Cu2+ que se reduce a Cu+

. Tanto los monosacáridos como los disacáridos

reductores reaccionan con el Cu2+ dando un precipitado

...