Extracción y ensayo de la actividad invertasa en levadura de pan

Extracción y ensayo de la actividad invertasa de levadura de panadería. Lever Olvera Miguel, Andrea Nikol Solís Alvarado

Universidad Autónoma de Querétaro, Facultad de Química, Ingeniería en biotecnología, Laboratorio de tecnología enzimática 4to semestre.

INTRODUCCIÓN

Con un pH ideal de 4.5 y estabilidad a 50°C, la invertasa, también conocida como beta fructofuranosidasa, es una glicoproteína que se encuentra en toda la biosfera, principalmente en plantas y microorganismos. Saccharomyces cerevisiae, también conocida como levadura de panadero, es la principal cepa utilizada para la producción y purificación de la enzima (Kulshrestha et al., 2013). Las invertasas catalizan la hidrólisis irreversible de la sacarosa en glucosa y fructosa libre (Wrigley et al., 2016).

DISCUSIÓN Y CONCLUSIÓN

No se logró satisfactoriamente la construcción de una curva de calibrado para la determinación de azúcares reductores utilizando el método de glucosa. Se logro satisfactoriamente la construcción de una curva de calibrado para el método Bradford la cual seguía una tendencia lineal sin embargo la preparación de las muestras problemas dio el resultado de que no se pudieran evaluar estas muestras por ser no confiables.

La precipitación de la enzima en el pH 4 significa que a ese pH la proteína esta en un punto zwitterionico en el cual la carga neta de la macromolécula es 0, de tal manera que no tiene una interacción polar suficiente con el agua como para mantenerse disuelta.

No pudimos determinar la actividad enzimática de la invertasa de S. cerevisiae. Se requieren estudios adicionales para evaluar la actividad enzimática de la invertasa en la levadura utilizada en la industria de la panadería.

REFERENCIAS

METODOLOGÍA RESULTADOS [pic 1][pic 2]

Nuestra curva de calibración de DNS no funciono por error en pipeteo, no muestra una tendencia lineal como debería este método y a pesar de realizar dos repeticiones no se pudo obtener una curva funcional. Debido a esto no hemos podido realizar la cuantificación de glucosa en las muestras de sacarosa tratadas con invertasa. [pic 3]

Nuestro ensayo con el método [pic 4]

de Bradford de misma manera

no funciono, por error en la

preparación de las muestras

problemas, dado a que estas no

presentaban similitud aceptable

en su absorbancia, dando

resultados inconclusos. De tal

manera que el calculo de

1.

Kulshrestha, S., Tyagi, P., Sindhi, V., & Yadavilli, K. S. (2013). Invertase and its applications – A brief review. Journal of Pharmacy Research, 7(9), 792–797. https://doi.org/10.1016/j.jopr.2013.07.014 2.

Wrigley, C. W., Corke, H., Seetharaman, K., & Faubion, J. (2016). Encyclopedia of Food Grains.

concentración mediante el uso de la curva de calibración era inútil a pesar de que la curva de calibración presentaba una tendencia lineal.

Nuestros valores de la curva de calibracion para y=a+bx

a=-0.095380952

b=0.2102857143

r=0.9823399981

[pic 5][pic 6]

Los resultados del ensayo de precipitado de enzima por pH de la solución son que la enzima precipita en pH acido, específicamente en el pH 4.

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