Determinación actividad enzimática: Invertasa de levadura
Enviado por Patricia Núñez • 6 de Mayo de 2023 • Ensayos • 1.131 Palabras (5 Páginas) • 86 Visitas
REPORTE DE LABORATORIO
Determinación actividad enzimática: Invertasa de levadura
Asignatura: BIO-005 y sección 2, grupo 1
Nombre de Autores:
Nombre de Docente del práctico: Pamela Gonzales Flies
Fecha de realización del práctico:
Resumen:
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Objetivos: Verificar la presencia de glucosa utilizando test de Fehling, realizar una extracción de la invertasa de la levadura.
Palabras claves:
Metodología:
Para la obtención de la enzima se colocó 15 gramos de levadura (Saccharomyces cerevisiae) en un mortero y se homogenizo en 18 ml de bicarbonato de sodio al 0,1M, se traspasó la mezcla a un tubo con 1,5 ml, y el otro tubo de falcon con el resto y se llevó a centrifugar a 2.000 rpm por 5 minutos, recuperando el sobrenadante el cual fue el extracto enzimático. Al tubo de 1,5 ml se llevó a hervir en un baño de termorregulación en cual como resultado fue el extracto enzimático hervido. Falta tiempo
Tubo | V sacarosa 0,02M (ml) | V sucralosa 0,5% (ml) | V almidón 1% (ml) | V NaOH 0,5% (ml) | VCuSO4 0,25% (ml) | V EE (ml) | V EEH (ml) |
1 | 2 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
2 | 2 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0,5 | 0 |
3 | 2 | 0 | 0 | 0 | 0 | 1 | 0 |
4 | 2 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 1 |
5 | 2 | 0 | 0 | 0,25 | 0 | 1 | 0 |
6 | 2 | 0 | 0 | 1 | 0 | 1 | 0 |
7 | 2 | 0 | 0 | 0 | 0,25 | 1 | 0 |
8 | 2 | 0 | 0 | 0 | 1 | 1 | 0 |
9 | 0 | 2 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
10 | 0 | 2 | 0 | 0 | 0 | 1 | 0 |
11 | 0 | 0 | 2 | 0 | 0 | 0 | 0 |
12 | 0 | 0 | 2 | 0 | 0 | 1 | 0 |
Con la tabla 1 se prepararon 12 tubos de ensayo agregando los compuestos que indica, posteriormente se llevaron los tubos a un baño termorregulador por 2 minutos, para detectar los productos de la catálisis se utilizaron los reactivos de Fehling del cual se agregaron 1 ml del reactivo de Fehling A y 1 ml de reactivo de Fehling B, a continuación se llevaron otra vez al baño termorregulador por 2 minutos, para posteriormente ubicar los tubos en la gradilla para esperar a que enfriaran.
Resultados:
N° de tubos | Resultado |
1 | Negativo |
2 | Positivo |
3 | Positivo |
4 | Negativo |
5 | Negativo |
6 | Negativo |
7 | Positivo |
8 | Negativo |
9 | Negativo |
10 | Positivo |
11 | Negativo |
12 | Negativo |
Cuestionario:
- ¿Qué es el reactivo de Fehling y que es lo que reconoce?
El reactivo de Fehling es un reactivo químico que se utiliza para diferenciar la estructura de grupos funcionales de los carbohidratos, y reconoce la glucosa y azucares reductores presente en la preparación.
- ¿Por qué la reacción de Fehling es negativa con sacarosa y positiva con los productos de la hidrólisis por invertasa?
La reacción es negativa por que la sacarosa es un disacárido, que carece de poder reductor, mientras que con la hidrolisis por la invertasa se produce la glucosa y fructosa, es por esto que la reacción de Fehling es positiva.
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