Introducción Fraccionamiento Subcelular

La célula es la unidad fundamental de la vida. Una célula es una unidad pequeña rodeada de una membrana que contiene una solución acuosa concentrada de sustancias químicas1, donde se encuentran suspendidos los organelos celulares que le permiten ser funcional. La célula eucariota posee compartimentos internos delimitados por membranas2. Entre éstos se encuentra el núcleo, delimitado por una doble unidad de membrana, en cuyo interior se encuentra el material genético o ADN que contiene la información necesaria para que la célula pueda llevar a cabo todas las tareas para su supervivencia y reproducción. Y las mitocondrias, organelos encargados de dar energía a la célula y llevar a cabo la respiración celular.

¿Es posible llevar a cabo el estudio de cada uno de los componentes celulares, por separado, para conocer sus funciones?

Es importante conocer la función de cada componente celular, separado de los otros componentes celulares, para así conocer la funcionalidad de la célula. Una de las técnicas más usadas para tal propósito es el fraccionamiento subcelular, método desarrollado por Alberte Claude y Christian Duve entre 1940 y 1950, que permite obtener componentes celulares aislados en grandes cantidades y con alto grado de pureza mediante la separación de los componentes de la célula en base a su tamaño y densidad3.

Esta técnica permite separar los componentes de la célula. Membranas y organelos celulares se separan mediante centrifugadoras, que hacen girar una suspensión homogenizada en un tubo Falcon, la que gracias a la fuerza centrífuga se divide por densidad y tamaño. Luego del centrifugado, algunas de las partículas más densas (algunos organelos como el núcleo) se van al fondo del tubo (Pellet) y las partículas menos densas (resto de componentes celulares como membranas y mitocondrias) forman un sobrenadante, que vuelve a ser centrifugado para ser purificado. Luego se usan moléculas características de cada una de las fracciones permitiendo ser marcados, por ejemplo el DNA es marcador de núcleos, las enzimas marcan la presencia de mitocondrias y la fotosíntesis marca la presencia de cloroplastos para identificar la presencia de organelos en la célula.

Este laboratorio tiene como propósito la obtención de mitocondrias mediante el proceso de fraccionamiento subcelular.

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