Invertasa
Enviado por bioquimicaua • 16 de Septiembre de 2015 • Apuntes • 1.323 Palabras (6 Páginas) • 216 Visitas
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Índice
Introducción …………………………………………………………………………………. Pág. 2
Objetivo del práctico ……………………………………………………………………. Pág. 3
Materiales…………………………………………………………………………………….. Pág. 4
Método experimental…………………………………………………………………… Pág. 5
Resultado ……………………………………………………………………………………. Pág. 7
Discusión……………………………………………………………………………………… Pág.
Conclusión …………………………………………………………………………………… Pág.
Cuestionario…………………………………………………………………………………. Pág.1
Bibliografía…………………………………………………………………………………… Pág. 1
Anexos ………………………………………………………………………………………… Pág. 1
Introducción
Las enzimas catalizan las reacciones disminuyendo la energía libre de activación necesaria para que las mismas ocurran
La conformación de una enzima es mantenida por las interacciones que se establecen entre las regiones específicas de los aminoácidos que componen la cadena polipeptídica. Debido a ello las misma es susceptible ante cambios en el ambiente en el cual se encuentra, siendo dos de los factores más importantes de temperatura y el pH. Cuando estos varían de forma tal que la conformación de la proteína es alterada, la enzima pierde su actividad. Eso provoca que cada enzima tenga sus condiciones óptimas de funcionamiento tanto de pH como temperatura.
En el proceso de la invertasa de la levadura comprendimos que la sacarosa que es comúnmente conocía como azúcar de mesa, es un disacárido compuesto por D-glucosa y D-fructosa que están unido mediante enlaces glicosídico. Cuando este enlace es roto en la reacción de hidrólisis, se genera una mezcla equimolar de glucosa y fructosa. La sacarosa puede ser hidrolizada en presencia de una enzima comúnmente denominada invertasa o sacarasa.
A diferencia de otras enzimas, la invertasa presenta actividad relativamente elevada en un rango amplio de pH (desde 3,5 a 5,5) con el optimo en pH=4,5. En cuanto a la temperatura, el máximo de actividad se registra alrededor de los 55°C.
La actividad de la invertasa es inhibida en presencia de metales pesados, por ejemplo los iones de Ag1+ atacan a la histidina de la cadena peptídica inactivándola. El CuSO4 en concentraciones elevadas también presenta un efecto inhibidor.
Si quieren modifiquen la introducción
Objetivos del Prácticos
El objetivo del práctico es realizar la extracción de la invertasa de levadura y posteriormente, se verificará su acción sobre una solución de sacarosa la misma se comprobará mediante el test de fehling, el cual permite detectar la presencia de los productos de la hidrólisis de este disacárido (glucosa y fructosa). Los cuales si da positivo los resultados la muestra queda de color rojo ladrillo y si da negativo da de color azul.
Materiales
Materiales/equipo
- Tubos de ensayo
- Gradilla para tubo de ensayo
- Micropipeta de 100-1000 µl
- Puntas para la micropipeta
- Calentados (baño maría)
Reactivos
- Fehling A
- Fehling B
- NaOH 0,5%
- CuSO4 0,25%
- Sacarosa 0,02 M
- Sucralosa 0,5M
- Almidón 1%
Muestra Biológica
- Extracto enzimático (EE)
Método experimental
- Proceso enzimático
Realizar una bacteria de tubos de ensayo siguiendo las indicaciones de la siguiente tabla
Tubo | Sacarosa 0,02M | NaOH 0,5% | CuSO4 0,25% | Extracto enzimático (EE) | Extracto enzimático hervido (EEH) |
1 | 2 ml | 0 ml | 0 ml | 0 ml | 0 ml |
2 | 2 ml | 0 ml | 0 ml | 0,5 ml | 0 ml |
3 | 2 ml | 0 ml | 0 ml | 1 ml | 0 ml |
4 | 2 ml | 0 ml | 0 ml | 0 ml | 1 ml |
5 | 2 ml | 0,25 ml | 0 ml | 1 ml | 0 ml |
6 | 2 ml | 1 ml | 0 ml | 1 ml | 0 ml |
7 | 2 ml | 0 ml | 0,25 ml | 1 ml | 0 ml |
8 | 2 ml | 0 ml | 1 ml | 1 ml | 0 ml |
Tubo | Sucralosa 0,5% | EE |
9 | 2 ml | 0 ml |
10 | 2 ml | 1 ml |
Tubo | Almidón 1% | EE |
11 | 2 ml | 0 ml |
12 | 2 ml | 1 ml |
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