Microscopio

Tema: microscopia 2

Objetivo general adquirir habilidades y destreza en el uso del microscopio y utilizar el método de medición indirecta con base en el diámetro del campo óptico

Objetivos específicos

1 desarrollar en el estudiante habilidades para utilizar enfocar y medir indirectamente en el microscopio

2 realizar montajes húmedo con papel milimetrado

3 conocer diverso tipos de microscopio

Pre laboratorio

Investigar en que consiste cada tipo de microscopio

a) Microscopio estereoscopio o de disección:

b) Microscopio compuesto: tiene más de una lente objetiva. Los microscopios compuestos se utilizan especialmente para examinar objetos transparentes, o cortados en láminas tan finas que se transparentan. Se emplea para aumentar o ampliar las imágenes de objetos y organismos no visibles a simple vista. El microscopio óptico común está conformado por tres sistemas:

• El sistema mecánico está constituido por una palanca que sirve para sostener, elevar y detener los instrumentos a observar.

• El sistema de iluminación comprende un conjunto de instrumentos, dispuestos de tal manera que producen las ranuras de luz.

• El sistema óptico comprende las partes del microscopio que permiten un aumento de los objetos que se pretenden observar mediante filtros llamados "de antigel subsecuente".

c) Microscopio de contraste de fases: permite observar células sin colorear y resulta especialmente útil para células vivas.1 Este aprovecha las pequeñas diferencias de los índices de refracción en las distintas partes de una célula y en distintas partes de una muestra de tejido. La luz que pasa por regiones de mayor índice de refracción experimenta una deflexión y queda fuera de fase con respecto al haz principal de ondas de luz que pasaron la muestra.

d) Microscopio electrónico: es aquél que utiliza electrones en lugar de fotones o luz visible para formar imágenes de objetos diminutos. Los microscopios electrónicos permiten alcanzar ampliaciones hasta 5100 veces más potentes que los mejores microscopios ópticos, debido a que la longitud de onda de los electrones es mucho menor que la de los fotones "visibles".

e) Microscopio de campo lumínico:

f) Microscopio de luz ultravioleta: depende de la absorción de esa luz por las moléculas de la muestra. La fuente de luz ultravioleta tiene una longitud de onda de 200 nm, por lo tanto puede alcanzar una resolución de 100 nm. La microscopia ultravioleta no es muy diferente del funcionamiento de un espectrofotómetro pero sus resultados son registrados en fotografías. La muestra no se puede observar directamente a través del ocular porque la luz ultravioleta puede dañar la retina. El método sirve para detectar ácidos nucleicos, proteínas que contienen determinados aminoácidos. Mediante longitudes de ondas específicas para la iluminación se puede obtener mediciones espectrofotométricas para cuantificar el ADN y el ARN de cada célula.

g) Microscopio de fluorescencia: es una variación del microscopio de luz ultravioleta en el que los objetos son iluminados por rayos de una determinada longitud de onda. La imagen observada es el resultado de la radiación electromagnética emitida por las moléculas que han absorbido la excitación primaria y reemitido una luz con mayor longitud de onda. Para dejar pasar sólo la emisión secundaria deseada, se deben colocar filtros apropiados debajo del condensador y encima del objetivo. Se usa para detectar sustancias con autofluorescencia (vitamina A) o sustancias marcadas con fluorocromos.

h) Microscopio de campo oscuro: (en inglés: Dark field microscope or dark ground microscope) es un microscopio que utiliza un haz enfocado de luz muy intensa en forma de un cono hueco concentrado sobre el espécimen. El objeto iluminado dispersa la luz y se hace así visible contra el fondo oscuro que tiene detrás, como las partículas de polvo iluminadas por un rayo de sol que se cuela en una habitación cerrada.

MARCO TEÓRICO

Si bien el aumento total obtenido en el microscopio compuesto indica los diámetros en que se ha aumentado la imagen, por ejemplo 100 veces (100 x), este no informa el tamaño real del objetivo observado.

Para medir los objetos microscopios existen métodos d precisos por medio del ocular micro métrico o regilla del ocular, que sirve de escala de referencia en el cual se ha calibrado el valor de una división con la ayuda del objetivo micrométrico para los diferentes aumentos

Por procedimiento sencillo también es posible estimar el tamaño de el organismo u objetivos observado al conocer el diámetro del campo

La unidad de medición con el microscopio es el micro=um. Al ser difícil tener una impresión real del tamaño de un micrón, algunos ejemplos ayudaran a precisar esta medida; el diámetro real de las bacterias oscila entre 0.5 y 1.0 um, generalmente que se observa a 1000 aumentos una mosca común con este mismo aumento se vería un poco mayor de 75 m. una bacteria esférica tiene un diámetro de 1um, un eritrocito de 7.5 um.

Determinación del diámetro del campo óptico a menor aumento

Coloque una pequeña muestra de papel milimetrado en montaje húmedo y enfoque un cuadro en 1 mm de lado ubique el cuadrado pequeño en un plano diametral y mida en mm el diámetro del campo óptico con el objetivo de menor aumento. una vez obtenido el (0) en mm realice la conversión a um.

Determine del diámetro del campo óptico a menor aumento:

Determine del cálculo del diámetro del campo óptico a mayor aumento

Con el objetivo de mayor aumento repita el procedimiento en caso de que se imposibilite la lectura de (0) realice el cálculo según el principio por el cual la oasar a un aumento mayor, la imagen se aumenta tantas veces mas y el campo óptico (0) se reduce proporcionalmente al aumento de empleado; así por ejemplo:

Diámetro del campo óptico a 10 x ( < aumento)= 1300 um, entonces diámetro del campo óptico a 40 x (>aumento)= (10/40)x1300=325um,

Elaboración de una escala de referencia con base a un retículo

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