Método de Lowry

ELABORACIÓN DE LA CURVA DE CALIBRACIÓN.

Tabla 1. Curva de calibración de albúmina o hemoglobina. Método de Lowry.

Cálculos para tubo 2:

La concentración de la solución proteica tenía una concentración de 0.25 mg/Ml, con este valor se realizan los cálculos correspondientes para el ajuste del volumen para cada tubo.

0.25 mg ------- 1 mL

                                                   0.05 mg = X ------ 0.2 mL

Como la cantidad de proteína se pide en µg, el valor de “x” se multiplica por 1000 quedando:     x= 50 µg

[pic 1]

Gráfico 1. Obtención de la curva tipo con relación a la cantidad de proteína y absorbancias obtenidas a 590 nm.

ANÁLISIS ESTADÍSTICO

Tabla 2. Réplicas para el análisis estadístico.

Cálculos para tubo 3:

Con la ecuación de la recta obtenida en la curva tipo despejamos “x” ya que esta incógnita representa la cantidad de proteína en µg y “y” representa la absorbancia.

[pic 2]

[pic 3]

Tabla 3. Resultados del análisis estadístico.

Cálculo para %C.V.:

Para determinar el coeficiente de variación se utiliza la siguiente fórmula:

[pic 5]

Cálculo para µ:

Para determinar el límite de confianza se utiliza la siguiente ecuación:

[pic 6]

El valor de “t” se determina con base al nivel de confianza que se pida, en este caso es de 95% y su grado de libertad (n-1) es de 9, por lo tanto, su valor en tablas es de 2.26. Con el dato obtenido se puede sustituir ya los valores a la ecuación:

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