PRÁCTICA 1: DETERMINACIÓN DE PROTEÍNAS POR EL MÉTODO DE LOWRY
Enviado por González Olvera Karla Sofía • 27 de Noviembre de 2022 • Apuntes • 959 Palabras (4 Páginas) • 142 Visitas
INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL [pic 1][pic 2]
ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS
MÉTODOS DE ANÁLISIS
PRÁCTICA 1: DETERMINACIÓN DE PROTEÍNAS POR EL MÉTODO DE LOWRY
PROFESORES:
LARIOS SERRATO VIOLETA
RUIZ CUELLO TATIANA
HERNANDEZ DERRAMADERO FERNANADO
INTEGRANTES:
GONZÁLEZ OLVERA KARLA SOFÍA
NERI MEJÍA ANA LAURA
Grupo:
5IV1
PRÁCTICA 1. DETERMINACIÓN DE PROTEÍNAS POR EL MÉTODO DE LOWRY
DETERMINACIÓN DE HEMOGLOBINA
TABLA 3. Curva de calibración de Hemoglobina
TUBO | Cantidad de proteína (µg) | A590 | |
Serie a | Serie b | ||
1 | 25 | 0.072 | 0.084 |
2 | 50 | 0.117 | 0.111 |
3 | 75 | 0.139 | 0.151 |
4 | 100 | 0.186 | 0.180 |
5 | 125 | 0.218 | 0.227 |
Para la calcular la cantidad de proteína (Regla de 3)
Ejemplo tubo 1:[pic 3]
Conversión de mg a microgramos:[pic 4][pic 5]
[pic 6]
[pic 7]
Gráfica 1: Curva Tipo de cuantificación de proteína en Hemoglobina.
TABLA 4. Replicas para el análisis estadístico (haciendo uso de 3 decimales)
TUBO | A590 | Cantidad de proteínas (µg) |
1 | 0.162 | 86.357 |
2 | 0.168 | 90.643 |
3 | 0.165 | 88.500 |
4 | 0.162 | 86.357 |
5 | 0.163 | 87.071 |
6 | 0.181 | 99.929 |
7 | 0.166 | 89.214 |
8 | 0.174 | 94.929 |
9 | 0.161 | 85.643 |
10 | 0.160 | 84.929 |
Ecuación para determinar la cantidad de Hemoglobina
[pic 8]
Ejemplo tubo 1: [pic 9]
TABLA 5. Resultados el análisis estadístico
[pic 10] | S | S2 | %C.V. | [pic 11] |
89.3572 | 4.7357 | 22.4277 | 5.2997 | [pic 12] |
TABLA 6. Efecto de algunas sustancias no proteínicas que interfieren en el método de Lowry
SUSTANCIA | A590 | Cantidad de proteínas (µg) | Tipo de interferencia generada |
Tris 1M, pH 7.0 | 0.130 | 63.5000 | SI (NEGATIVA) |
Glicerol al 1% | 0.168 | 90.6429 | NO |
Detergente comercial al 1% | 0.158 | 83.5000 | SI (NEGATIVA) |
Dodecil sulfato de sodio (SDS) al 1.0% | 0.154 | 80.6429 | SI (NEGATIVA) |
Ácido tricloroacético (TCA) al 5% | 0.142 | 72.0714 | SI (NEGATIVA) |
Fenol al 1% | 2.318 | 1626.3571 | SI (POSITIVA) |
Mercaptoetanol al 1.0% | 0.157 | 82.7857 | SI (NEGATIVA) |
Tris 1M. pH 10.0 | 0.144 | 73.5000 | SI (NEGATIVA) |
Urea al 5% | 0.167 | 89.9286 | NO |
Sulfato de amonio al 3% | 0.137 | 68.5000 | SI (NEGATIVA) |
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