OBSERVACION DEL ADN

Objetivo: El objetivo principal de este experimento es el de poder observar sin ayuda de ningún instrumento óptico el ADN.

Justificación: El poder ver el ADN sin necesidad de los instrumentos ópticos y con materiales caseros, hace de esta practica algo mas económico y practico, además de reforzar lo ya visto en clase y conocer como es la estructura física de este.

Antecedentes

1. Investigar al menos un método de extracción o aislamiento del ADN.

2. ¿Por qué se utilizó ablandador de carne, alcohol y detergente líquido?

1. Para extraer los ácidos nucleicos del material biológico es preciso provocar una lisis

celular, inactivar las nucleasas celulares y separar los ácidos nucleicos de los restos de células. El procedimiento de lisis idóneo suele consistir en un equilibrio de técnicas y ha de ser suficientemente fuerte para romper el material inicial complejo (un tejido, por ejemplo), pero suficientemente suave para preservar el ácido nucleico

diana. Entre los procedimientos usuales de lisis figuran los siguientes:

==> rotura mecánica (trituración, lisis hipotónica, etc.)

==> tratamiento químico (detergentes, agentes caotrópicos, reducción con tioles, etc.)

==> digestión enzimática (Proteínas K, etc.).

Es posible romper la membrana celular e inactivar las nucleasas intracelulares al

mismo tiempo. Por ejemplo, una misma solución puede contener detergentes que

solubilicen las membranas celulares y sales caotrópicas fuertes que inactiven l as

enzimas intracelulares. Tras la lisis celular y la inactivación de las nucleasas, los

restos de células se eliminan fácilmente por filtración o precipitación.

2. Se ha usado una licuadora para separar las células unas de otras, en esto ayuda también el detergente.

El detergente y el ablandador de carne son necesarios para destruir todas las estructuras que protegen al ADN.

Las enzimas destruyen a las células y hacen posible que se pueda ver el ADN que contienen.

Material

o Hígado de pollo

o Detergente liquido

o Enzimas ( suavizador de carne o jugo de papaya)

o Alcohol blanco

o Licuadora

o Recipiente de vidrio o plástico (alto y delgado)

o Vaso de precipitado

o Una cuchara

o Material de limpieza (para limpiar el área terminando la practica)

Procedimiento

1.- Debemos cortar en pequeños trozos el hígado de pollo, luego lo colocamos en la licuadora y vertemos suficiente agua como para que, al cabo de 10 segundos de licuar, tengamos la consistencia de una crema.

Medimos el licuado en el recipiente y añadimos ¼ de detergente líquido del total del licuado.

Revolvemos suavemente con ayuda de una cuchara.

2.- Añadimos 1 cuchara de Enzimas (en este caso podemos usar suavizador de carne o jugo de papaya) y revolvemos con cuidado y lentamente por unos 5 minutos. Si mezclamos con demasiada rapidez o con mucha fuerza se corre el peligro de romper el ADN, con lo que no podríamos observarlo.

3.- Vertemos la mezcla en un recipiente alto y delgado hasta la mitad.

Ladeamos el recipiente y vertemos alcohol con mucho cuidado, evitando que se mezcle con el líquido de abajo.

Luego de unos minutos se podrá observar unos filamentos blancos dentro del alcohol y que se elevan de la mezcla de hígado, detergente y enzimas lo cual será el ADN.

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