PREINFORME

PRACTICA No. 1 – Normas Generales de Bioseguridad

Tipo de practica Porcentaje de evaluación Horas de la practica Temáticas de la práctica Intencionalidades formativas

Esterilización, Desinfección y Manejo de Equipos de Laboratorio Propósito(s): Durante el trabajo del laboratorio de microbiología, se dan situaciones de potenciales riesgos que varían según el agente infeccioso y los procedimientos utilizados. Las Normas de Bioseguridad pretenden reducir a un nivel aceptable el riesgo inherente a la manipulación de material peligroso. Objetivo(s): 1. Establecer normas y principios básicos de comportamiento en el laboratorio. 2. Aprender y utilizar los métodos de esterilización disponibles en el laboratorio. 3. Conocer los materiales y equipos utilizados en el laboratorio de microbiología. Meta(s): Competencia(s)

Fundamentación Teórica El trabajo en el laboratorio de microbiología es un trabajo de grupo. La actitud ante las practicas seguras de cada uno de los integrantes del equipo, determinan su propia seguridad, así como la de sus compañeros y la de la colectividad del Laboratorio. Las características especiales del trabajo en el laboratorio, hacen importante que todos los participantes conozcan y respeten las normas mínimas de bioseguridad. La primera actividad que debemos desarrollarantes de realizar el trabajo de laboratorio es la de conocer y aplicar los principios de bioseguridad para ser conscientes de los riesgos a que se puede estar expuesto. Se recomienda revisar los videos microscopio parte 1 y microscopios parte 2 disponibles en http://www.unad.edu.co/curso_biologia/multimedia.htm. Descripción de la practica 7

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Procedimiento: • Observe el material de vidrio y pida al Tutor y coordinador que le enseñe su adecuada manipulación. (cajas de petri, pipetas diferentes volúmenes, pipetas de Pasteur). • El material de vidrio en microbiología siempre debe ser utilizado estéril por lo que debe ser empacado con papel kraft antes de ser sometido a un proceso de esterilización, se debe tener especial cuidado en la manipulación del material ya que se puede contaminar con microorganismos provenientes de las manos, etc. • Identifique las asas de platino y reciba las indicaciones de uso por parte del Tutor o coordinador de laboratorio. • Prepare el material (vidriería) para hornear, recúbralo con papel Kraft, y séllelo con cinta indicadora de esterilidad. Proceda a esterilizarlo en el Horno a temperatura de 160 - 180 ºC, durante 2 horas. • Esterilice los medios de cultivo que el tutor le suministre en el autoclave a presión de 15 lb y 121 ºC durante 20 minutos. Tenga en cuenta las instrucciones de manejo de la autoclave. • Teniendo en cuenta lo observado en el vídeo sobre esterilización realice el lavado delmaterial de laboratorio suministrado, realice la prueba de azul de bromotimol y verifique si el material fue lavado correctamente. Recursos a utilizar en la práctica (Equipos / instrumentos) Cajas de petri, pipetas diferentes volúmenes, pipetas de Pasteur, horno, autoclave, azul de bromotimol Software a utilizar en la práctica u otro tipo de requerimiento para el desarrollo de la práctica Recomendaciones Para iniciar el desarrollo de la práctica debe previamente realizar un estudio atento de la teoría sobre: Bioseguridad, Equipos y materiales para manejo microbiológico con bioseguridad , Esterilización, agentes esterilizantes. y observar los vídeos correspondientes: Normas de Bioseguridad parte 1 - Normas de Bioseguridad parte 2 - Vídeo Esterilización y desinfección No olvide las recomendaciones de seguridad que dan en la ficha técnica de este documento. Seguridad Industrial Se deben tener en cuenta las normas de bioseguridad Metodología Se deben llevar los materiales solicitados y desarrollar un preinforme que responda el siguiente cuestionario y luego del desarrollo de la práctica, se debe entregar el informe de práctica: Cuestionario de entrada para entregar en el preinforme 1. ¿Qué es bioseguridad? 2. ¿Cuáles son las normas básicas de bioseguridad en el laboratorio de microbiología? 3. Mencione las clases de esterilización, cuales son los agentes de esterilización con más uso en el laboratorio, en qué consiste cada uno de ellos y para qué materiales se utilizan:

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Agente de esterilización Esterilización con calor seco Esterilización con calor húmedo Radiaciones Filtración

Temperatura de uso (si se aplica)

Equipo Material que se puede utilizado esterilizar por este método.

4. Establezca las diferencias entre esterilización y desinfección 5. ¿Qué es un medio de cultivo; de qué están compuestos principalmente; cómo se clasifican según su proporción de agar y según su suministro de nutrientes? 6. ¿Cuál es la utilidad de los medios de cultivo y qué diferencia un caldo de un medio sólido? 7. ¿Cuál es el fundamento de la coloración de Gram? 8. ¿Qué diferencias encuentra entre bacterias Gram positivas y Gram negativas? 9. Indique las principales características y estructuras en hongos y levaduras Sistema de Evaluación El aprestamiento del laboratorio (los materiales que se deben llevar para el desarrollo de las prácticas y los pre informes) vale un 25% de la nota; el dominio de los temas y el desarrollo del laboratorio tienen un valor del 45% y la entrega del informe vale un 30%. Informe o productos a entregar Informe de práctica Rúbrica de evaluación Ítem Calif. Baja Calif. Media Calif. alta Puntaje Aprestamiento No se lleva Solamente se Se llevan al 25 aprestamiento o no se lleva laboratorio la lleva preinforme (0 aprestamiento o totalidad de puntos) preinforme, o se materiales presentan solicitados y el incompletos (10 preinforme puntos) completamente diligenciado (25 puntos) Práctica No se presenta a la Llega tarde a la Se cumplen los 45 práctica (0 puntos) práctica o no objetivos dela desarrolla los práctica (45 laboratorios en puntos) su totalidad (15

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Informe

No presenta informe (0 puntos)

puntos) El informe se presenta incompleto o sin conclusiones (10 puntos)

Se entrega el preinforme completamente diligenciado (30 puntos)

30

100 Retroalimentación

10

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PRACTICA No. 2– Medios de Cultivo

Tipo de practica Porcentaje de evaluación Horas de la practica Temáticas de la práctica Intencionalidades formativas

Presencial Otra ¿Cuál

x Autodirigida 10% 2

Remota

Medios de cultivo Propósito(s): Los estudiantes deben conocer que para el desarrollo microbiano se requieren diferentes condiciones, que les brindan los medios de cultivo y que nos permiten diferencias y aislar los microorganismos Objetivo(s): 1. Aprender la preparación y manipulación de los medios de cultivo. Meta(s): • Preparar al menos dos medios de cultivo Competencia(s): • El estudiante desarrolla habilidades para preparar medios de cultivo para el trabajo en laboratorio

Fundamentación Teórica Uno de los sistemas más importantes para la identificación de microorganismos es observar su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el laboratorio. El material alimenticio en el que crecen los microorganismos es el Medio deCultivo y el crecimiento de los microorganismos es el Cultivo. Se han preparado más de 10.000 medios de cultivo diferentes. Para que los microorganismos crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial éste debe reunir una serie de condiciones como son: temperatura, grado de humedad y presión de oxígeno adecuada, así como un grado correcto de acidez o alcalinidad. Un medio de cultivo debe contener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios y debe estar exento de todo microorganismo contaminante. La mayoría de las bacterias patógenas requieren nutrientes complejos similares en composición a los líquidos orgánicos del cuerpo humano. Por eso, la base de muchos medios de cultivo es una infusión de extractos de carne y Peptona a la que se añadirán otros ingredientes. 11

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Descripción de la practica Procedimiento: Preparación de medio de cultivo • Revise la etiqueta de los medios de cultivo, anote el nombre, la composición y forma de preparación. • Realice los cálculos para preparar los siguientes volúmenes de medio de cultivo tanto líquido como sólido: 325, 356 ml, 1567 ml, 131 ml y 24 ml • Prepare en un elenmeyer 325 mililitros de agar. De acuerdo a las indicaciones de preparación se utilizan 20 gramos de medio deshidratado por litro de agua. Recuerde para el cálculo se realiza una regla de tres: 20 gr....... 1000 ml X= (20 gr.x 325ml)/1000= 6.5 gr. X gr......... 325ml

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