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PRÁCTICA 3: Purificación de Levaduras


Enviado por   •  30 de Septiembre de 2019  •  Síntesis  •  506 Palabras (3 Páginas)  •  129 Visitas

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EXPERIENCIA CURRICULAR BIOTECNOLOGIA GENERAL

DOCENTE/COORDINADOR: SEGUNDO ELOY LOPEZ MEDINA

SEMESTRE: 2019 – II        CICLO: 10        FECHA:

PRÁCTICA 3: Purificación de Levaduras

  1. Introducción

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  1. Objetivos

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  1. Material y métodos

Material por mesa

  • 2 papas.
  • Agar.
  • Azúcar blanca.
  • Paquete de gaza
  • 1.5 L de agua destilada
  • 1 botella de Alcohol de 1L
  • 1 botella pequeña de lejía Clorox.
  • 1 paquete de Algodón.
  • 1L de ron de quemar.
  • Papel toalla.
  • Jabón líquido.

Material por alumno

  • 2 Mecheros.
  • 5 frascos de penicilina (con el medio autoclavado)
  • Asa bacteriológica.
  • Material de bioseguridad (mascarilla y gorro).
  • Mandil (Obligatorio).
  • Plumón indeleble.
  • Navaja.

Procedimiento para preparación de medio agar papa (con 2 días de anticipación a la práctica).

  1. En un vaso de precipitación se procederá a incorporar el agua destilada y la “papa” en pequeños trozos, hasta llevarla a ebullición. Luego el concentrado se filtrará con gaza, para depositarlo en un matraz. Finalmente se aforará e incorporará el agar y el azúcar, hasta homogeneizar el medio.

[pic 3][pic 4][pic 5]

Figura 1. Cantidades de agar, azúcar y papa, para 100 ml de medio de cultivo agar papa.

Nota: Cantidades de agar, papa y azúcar basados en 100 ml, calcular por regla de tres ante menores cantidades de medio.

  1. Cumplida esta actividad, se servirá entre 1.5 a 2 ml de medio de cultivo a los frasquitos de penicilina.
  2. Inmediatamente sellar con algodón y envolver en papel. Rotular y autoclavar a una 1atm. de presión y 120 °C, por 30 minutos.
  3. Una vez autoclavado el medio, colocar a enfriar los frascos de penicilina en una posición ligeramente horizontal para que el medio gelifique inclinado.

Procedimiento para purificación de levaduras

  1. En laboratorio, hacer el reconocimiento de las colonias de levaduras, cultivadas en la placa de Petri de la semana pasada.
  2. Se procederá a desinfectar el área de trabajo con lejía al 2 % y alcohol. El estudiante hará uso de sus implementos de bioseguridad (mandil, gorro, mascarilla), además de encender sus mecheros.
  3. Se procederá a quemar el asa bacteriológica. Luego se dejara enfriar por unos minutos, para tomar una muestra de la colonia de levaduras.
  4. Se procederá a llevar la muestra a los frasquitos de penicilina, donde se sembrara por estriado.
  5. Finalmente se flameara la boca de los frasquitos antes de sellarlos. Esta metodología se repetirá para cada frasco.

Nota: La presentación de las levaduras se realizara a la semana siguiente. Cada alumno deberá presentar sus 5 frascos al docente encargado de dirigir la práctica. El calificativo es de 4 puntos por cada frasco bien sembrado.

  1. Resultados

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