Practica 5 Selección de cepas para transformación

Practica 5

SELECCIÓN DE CEPAS PARA TRANSFORMACIÓN

CUESTIONARIO

1. En la actualidad, ¿sólo las E. coli se usan como hospederas para usarlas como sistemas de expresión génicas?

Actualmente, se usan diferentes tipos de vectores para la expresión génica, los principales son los plásmidos, los bacteriófagos, los cósmidos, vectores transbordadores, células eucariotas y cromosomas artificiales, entre otros

2. .¿Cuáles son las ventajas y desventajas de usar E. coli en los trabajos de expresión génica

• ventajas que este microorganismo brinda como hospedero están: mayor velocidad específica de crecimiento que las levaduras y células de mamíferos; fácil manipulación genética, no posee requerimientos costosos asociados a medios de cultivo o equipamiento a diferencia de las células de organismos superiores; existencia de gran variedad de vectores de expresión estables, y ser un microorganismo aprobado por las entidades reguladoras para su utilización

• como hospedero en la producción de biofármacos

• Otra ventaja de E. coli es que puede aceptar una amplia gama de vectores, como los plásmidos, los bacteriófagos y los cósmidos, entre otros

• Se ha usado a E. coli para la producción de muchas sustancias de interés médico, como proteínas y vitaminas, mediante la inserción de los genes que las codifican .Un ejemplo de esto, es la producción de grandes cantidades de insulina en cultivos de E. coli transgénica.

3. ¿Qué otros microorganismos se usan para realizar expresión in vivo de secuencias clonadas?. Qué otros organismos en la actualidad se usan para estudios de expresión in vivo de secuencias clonadas?

• Bacillus subtilis. Esta bacteria normalmente no es patógena, no produce endotoxinas y secreta proteínas al medio. No existen tantos estudios de cómo usar esta bacteria como hospedero, como los existentes para E. coli, y muchas veces se presentan problemas al usarla como hospedador porque no es fácil adaptarla para la clonación de genes ,puesto que su maquinaria biosintética no es tan flexible como la de E. coli.

• El hospedero eucariota más empleado es la levadura Saccharomyces cerevisiae, puesto que de ésta se conoce mucho desde el punto de vista genético y se tiene un "catálogo" completo de genes y mutaciones, así como la identificación del plásmido 2m , de origen natural, el cual constituye un excelente vector .

• se han usado otros hospederos eucarióticos para la clonación de DNA foráneo, como ser hongos (Aspergillus sp. y Neurospora crassa con los más usados) y algas unicelulares

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