Practica De Laboratorio

PRACTICA Nº 5

AISLAMIENTO DE MICROORGANISMOS DE CULTIVOS MIXTOS

Es necesario manejar el cultivo puro, libre de otras clases de organismos. Para hacerse esto debe aislarse una sola célula de todas las demás y ser cultivadas de tal manera que su progenie colectiva también permanezca aislada, se cuenta con varios métodos y uno de los métodos más utilizados es el de sembrado en placa por agotamiento en estría.

A diferencia que las bacterias crecen en un medio liquido, las células bacterianas que crecen sobre o dentro de medios sólidos, están inmóviles si se les coloca algunas cuantas células en el medio gelatinoso, cada célula va dar una colonia, si la suspensión esta diluida las colonias estarán separaras, de esta manera se deriva de una célula única. Para estar seguro de tomar una colonia del tipo que se desea se suspende en suero fisiológico o caldo peptonado y se resiembra en placa nueva. Repetir varias veces estas pruebas asegura tener un cultivo puro.

Un material o muestra de alimento dado puede contener muchos microorganismos de diversas especies, si le proporcionamos un medio de cultivo adecuado, logramos que puedan desarrollarse gran parte de la población bacteriana que se va evidenciar con la formación de colonias características para cada especie. Con el objetivo de que cada organismo tenga la oportunidad de crecer y ser reconocido, se utilizan medios de cultivos sólidos evitando aglomeración de las colonias de otra manera la competencia hará que algunas especies de bacterias no formen colonias.

La suspensión original puede ser sembrada por estrías con una aza de alambre sobre una placa de agar . Al ir avanzando las estrías menos aglomeradas de bacterias van siendo dejadas con el ansa de siembra y pueden depositar células aisladas en el agar, después para recultivar la placa de cualquier colonia bien aislada puede ser removida, resuspendidas en caldo peptonado y sembradas por estrías en agar simple u otros medios sólidos. Este es un método de confianza y rápido.

OBJETIVOS

- Aprender a cultivar bacterias.

- Aislar colonias de bacterias y observar el desarrollo bacteriano.

- Hacer un estudio cultural de las colonias bacterianas

- Obtener cultivos puros.

MATERIAL Y EQUIPOS

- Medios de cultivos servidos en placas* Gasa

- Ansas de siembra * Algodón

- Incubadora * Pabilo

- Baño maría * Plumón indeleble(Marcador) punta fina.

- Horno esterilizador * Fósforo (encendedor)

- Autoclave * Papel Kraf, Manteca, etiquetas

- Mechero de bunsen * Guantes, mascarilla, gorro

- Placas petri * Alcohol

* Papel toalla * Muestra de alimento contaminado

* Materiales que debe traer cada alumna para ingresar a laboratorio.

PROCEDIMIENTO

- Tener los medios de cultivos servidos en placas a temperatura ambiente debidamente controlados ( estériles), dejar en la mesa de trabajo

- Colocar sobre la mesa la muestra ( Alimento), y el asa de siembra.

- Coger el asa de siembra con la mano derecha y esterilizar al fuego en el mechero en posición oblicua.

- Con la mano izquierda coger el frasco o tubo que contiene la muestra y con el borde de la mano derecha destapar el tubo, el asa de siembra debe mantenerse en la misma mano derecha.

- Dejar el frasco o tubo en la gradilla, previamente taponado.

- Coger la placa petri con la mano izquierda abrir las dos tapas en ángulo de 45º, introducir el asa dentro de la placa y tocar un extremo del medio y colocar el inoculo haciendo una estria corta dirigido al centro del placa, esterilizar el ansa a rojo vivo, enfriar en el centro del agar y hacer las

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