Practica N1 BIOMOLECULAS

Practica N1

BIOMOLECULAS

NIYIRETH ORTIZ GUACA: KEVIN ESTIVEN RAYO; A. SMITH LOZANO

1. RESUMEN

La práctica de laboratorio de biomoléculas  se realizó en las instalaciones de la Universidad de la Amazonia, Laboratorio de bioquímica  con la  finalidad  de determinar la presencia de diferentes biomoléculas en los alimentos diferenciando los tipos de ensayos cualitativos, y determinar la presencia de carbohidratos, lípidos y proteínas. Se utilizaron 9 muestras con diferentes contenidos papa, manzana, naranja, huevo, pan, leche entera, yogurt y aceite

 Palabras Clave: papa, manzana, naranja, huevo, pan, leche entera, yogurt, aceite, carbohidratos, biomoléculas.

MATERIALES Y METODOS

Biológicos: Papa, Manzana, Naranja, Huevo, Pan, Leche Entera, Yogurt, Aceite.

Reactivos: Reactivo de Feling A, Reactivo de Feling B, Solución Salina, Solución de glucosa, Sacarosa, Solución de Almidón, Solución de albumina, HNO3, Ácido oleico, Éter etílico o éter de petróleo, Oxalato de amonio, Reactivo de Biuret, Nitrato de Plata.

Vidriería: 18 tubos de ensayo, 23 vaso de precipitados de 50 ml, 2 vaso de precipitado de 100 ml,1 pipeta de 10 ml, 1 agitador.

Equipos: Gradilla para tubos, Pinza para tubos, Pipeteador, Gaza, Baño Termostad. Mortero

Otros: Bisturí o cuchilla

Se prepararon las muestras y se juntaron en un mismo mesón, una seguida de la otra según su orden, cada una con su respectiva pipeta.

Muestra de Papa: Primeramente, se retiró su corteza, se dividió en cuadros y se macero en el mortero, simultáneamente se le agrego agua en pequeñas cantidades, hasta que se formó una masa homogénea, posteriormente se filtró y finalmente se depositó en un vaso de precipitado de 50 ml, rotulado cómo #1.

Muestra de Manzana: Se retiró su corteza, se dividió en cuadros y se macero en el mortero, se le agrego agua en pequeñas cantidades, hasta que se formó una masa homogénea, posteriormente se filtró y finalmente se depositó en un vaso de precipitado de 50 ml, rotulado cómo #2.

Muestra e Naranja: Se cortó transversalmente justo en la mitad, exprimiendo y filtrando el jugo de ella, finalmente depositado en un vaso de precipitado de 50 ml, rotulado cómo #3.

Muestra del Huevo: Primero se aisló la clara del huevo de la yema del huevo, seguidamente en un vaso de precipitado de 50 ml, se diluyo totalmente la clara en 30 ml de suero fisiológico, se homogenizo, rotulado cómo # 4. La yema de huevo se rotulo como #5 en otro vaso de precipitado.

Muestra de Pan: Primeramente, se fragmento el pan y humedeció con agua destilada, hasta el punto donde se obtuvo una pasta homogénea y suave, depositada en un vaso de precipitado de 100 ml rotulado como #6.

Muestra de Leche Entera: Simplemente se situó en un vaso de precipitado de 50 ml, rotulado como #7.

Muestra de Yogurt: Sencillamente se puso en un vaso de precipitado de 50 ml, rotulado como #8.

Muestra de Aceite: Se depositó en un vaso de precipitado de 50 ml sin ningún tratamiento, rotulado como #9.

RECONOCIMIENTO DE CARBOHIDRATOS EN MUESTRAS DE ORIGEN VEGETAL Y ANIMAL.

Identificación de carbohidratos mediante su poder reductor: Se rotularon 13 tubos y a cada uno se le añadió 1 ml de las muestras en su tubo rotulado a saber, mas cuatro sustancias como muestras nuevas, agua, solución de glucosa, solución de sacarosa y solución de almidón, después de tener cada tubo con su sustancia específica, se le añadió 1 ml de Feling A e inmediatamente 1 ml de Feling B, a cada uno de los tubos, se homogenizaron las muestras e inmediatamente se llevaron al baño Termostad por 5 minutos, finalmente se verifico el cambio de coloración anaranjado intenso y formación de un precipitado naranja intenso o rojo ladrillo.

Identificación de carbohidratos complejos (polisacáridos): Se rotularon 13 tubos y a cada uno se le añadió 1 ml de las muestras en su tubo rotulado a saber, mas cuatro sustancias como muestras nuevas, agua, solución de glucosa, solución de sacarosa y solución de almidón, consecutivamente se le añadieron de 2 a 5 gotas de lugol, se mezclaron y se observó la formación de un color morado oscuro o violeta intenso.

RECONOCIMIENTO DE LÍPIDOS EN MUESTRAS DE ORIGEN VEGETAL Y ANIMAL

Identificación de lípidos por solubilidad e interacción con colorante: En la primera serie de 13 tubos, se le agrego un ml de agua y se dejó en reposo, se apuntó el número de fases que se formaron, seguidamente se le añadió de 3 a 5 gotas de sudan III, agitando y reposando, después se identificó el cambio de coloración a naranja o roja y la fase en que se presentó

RECONOCIMIENTO DE PROTEÍNAS EN MUESTRAS DE ORIGEN VEGETAL Y ANIMAL

Identificación de proteínas con el reactivo de biuret: Se rotularon 13 tubos y se le añadieron 1 ml de cada una de las muestras, en su tubo rotulado a saber, como muestras nuevas se tenía el agua y la Albumina, después se le agrego 1 ml del reactivo de Biuret a cada uno de los tubos, se realizó homogenización, procedentemente se verifico el cambio de coloración azul del reactivo a rosado o violeta en presencia de proteínas.

Identificación de las proteínas con la reacción de xantoproteica: Con la misma cantidad de muestras del procedimiento anterior, se le agregaron 1 ml de sln de HNO3 concentrado a cada uno de los tubos, se homogenizaron las muestras y finalmente se verifico la formación de un precipitado amarillo en presencia de proteínas.

INTRODUCCIÓN

Las biomoléculas son la materia prima con que se encuentran construidos los seres vivos; siendo la base esencial y fundamental de la vida y de la salud. Las biomoléculas son indispensables para el nacimiento, desarrollo y funcionamiento de cada una de las células que forman los tejidos, órganos y aparatos del cuerpo, y su carencia, deficiencia, insuficiencia o desequilibrio, provoca el deterioro de la salud y el surgimiento de la enfermedad.

Ella son las que constituyen a los seres vivos. Las inorgánicas, aunque se encuentran en baja proporción, son imprescindibles en numerosos procesos fisiológicos. El hierro por ejemplo, para constituir la hemoglobina y que sea funcional.

Las orgánicas tienen distintas funciones. Son 4: glúcidos, lípidos, proteínas y ácidos nucleicos. Los glúcidos tienen función energética a corto plazo y estructural; los lípidos, función energética a largo plazo y estructural; las proteínas tienen diversos papeles tales como estructurales, etc...Los ácidos nucleicos portan la información genética y contribuyen en la cadena hacia ha producción de las proteínas.

Estas al ser parte fundamental del cuerpo humano se encuentra en muchos alimentos,  pueden clasificarse  a grandes rasgos, se describen como:

• GLÚCIDOS son sustancias orgánicas ternarias de origen casi vegetal, en donde predominan el Carbono (C), Hidrógeno (H) y Oxígeno (O). Son ejemplos el Almidón, las Féculas y los distintos tipos de Azúcares presentes en las Hortalizas, frutas y verduras frescas y en aquellos productos alimenticios elaborados con harinas.

• CARBOHIDRATOS: son los que proveen de energía al organismo .Los más importantes incluyen a los azúcares, almidón, celulosa y fibra. Se encuentran en azúcares refinadas, miel, mermeladas, jaleas, golosinas, leche, hortalizas y frutas, cereales, legumbres, harinas, pan, pastas, arroz, papa, elote, camote, tortillas y todos los derivados de los granos.   Los carbohidratos, glúcidos, azúcares o sacáridos son aldehídos o cetonas polihidroxilados (osas), o productos derivados de ellos por polimerización (ósidos), reducción (alcoholes polihídricos y ciclitoles), oxidación (ácidos aldónicos, urónicos y sacáridos), sustitución (aminoazúcares) y esterificación (sulfatos y fosfatos), cuya fórmula empírica es (CH2O)n n≥3.  (Gallego & Hernández, 1999). Estos sirven como almacenes de energía, combustibles e intermediarios metabólicos (Melo & Cuamatzi, 2007). Y están presentes en muchos alimentos que representan en general una importante fuente de energía para el organismo. Sea cual sea su composición, cuando son digeridos producen monosacáridos que pasan a la circulación de la sanguínea con la posibilidad de intervenir en el metabolismo  energético (Bello, 2000). Se trata de la principal fuente de energía del cuerpo y existen dos presentaciones: los carbohidratos complejos y los carbohidratos simples. Los carbohidratos simples son moléculas relativamente pequeñas como (sacarosa, glucosa y fructosa) (Pickering,  2000), los carbohidratos complejos son granos, legumbres, bulbos y verduras  posible a su estado natural. Los complejos contienen muchos más nutrientes que sus compañeros, los simples; además q cuentan con gran cantidad de fibra soluble e insoluble. (Boice, 2002).

• PROTEÍNAS son compuestos orgánicos cuaternarios de composición muy compleja. Están presentes en los alimentos de origen animal y vegetal. Es abundante su contenido proteico en las carnes, los huevos y la leche y sus derivados. son polímeros lineales en los que las unidades monoméricas son los aminoácidos, que se pliegan en una notable diversidad de formas tridimensionales, que les proporcionan una correspondiente variedad de funciones. Actúan como componentes estructurales de mensajeros y de receptores de mensajero. Algunas proteínas se unen al ADN y regulan la expresión de los genes, otras participan en la replicación, la transcripción y la traducción de la información genética; otras están relacionadas con el sistema inmunitario, con la contracción muscular, con el transporte de oxígeno y la respiración celular. (Blanco et al, 2006)

La mayor parte de las proteínas son electrolitos anfóteros (anfolitos), cuando son solubles forman disoluciones coloidales, de las que precipitan por adición de sales (por ejemplo, cloruro de sodio o sulfato de magnesio); en este proceso no se produce un cambio escencial en las propiedades físicas ni en las químicas. La solubilidad de las proteínas depende tanto del valor del pH como del contenido en sales, alcanzando su valor mínimo en el punto isoeléctrico.

Las proteínas coagulan o precipitan al ser calentadas; la albúmina, la proteína existente en la clara de huevo , constituye un ejemplo muy conocido de proteínas fácilmente cooagulable por el calor. Las sales de ciertos metales pesados (plata, mercurio plomo) también precipitan las proteínas. La ingestión inmediata de sustancias proteicas tales como la clara de huevo es un antídoto frente a un casual envenenamiento con metales pesados, basándose precisammente en este comportamiento; la acción cauterizante del nitrato de plata constituye otro ejemplo. Las proteínas también son precipitadas por ciertos ácidos, la precipitación de una proteína mediante cualquier agente es un cambio irreversible y se dice que la proteína está desnaturalizada. (Linstromberg, 1979).

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