Práctica 11. Cromatografía En Columna

Al realizar la cromatografía en columna, metimos un pedazo de algodón y agregamos 5 ml de acetato de etilo. Para preprar el gel, mezclamos 8 g de sílica gel en 30 mL de acetato de etilo. La vertimos en la columna con mucho cuidado de no dejar residuos en las paredes.

Nos dieron una mezcla contaminada con ácido benzoico, y para que la pudiéramos ver mejor, se añadió azul de metileno, la cual preparamos con 0.4 g de la mezcla con 3 ml de eluyente.

Se observaba una columna con una tonalidad azul.

Marcamos 6 tubos de ensayo, y en cada uno de ellos abrimos la llave para dejar salir 6 ml aprox. en cada uno, sin dejar que la columna se secara.

Por separado, en los frascos para la cromatografía, añadimos una mezcla de hexano-acetato de etilo 2:1. Tomamos una muestra con el capilar de un tubo enumerado y pusimos una gotita junto a una muestra patrón de la muestra problema.

La dejamos correr, y la revelamos en la cámara UV.

Hicimos lo mismo para cada uno de las muestras en los tubos.

ANÁLISIS DE RESULTADOS

Al revelar las cromatoplacas de las diferentes muestras tomadas de los tubos, no observamos mayores cambios, sino hasta el tubo 5 y 6. Las manchas patrón y muestra corrían al mismo nivel.

Esto nos muestra que conforme más arriba en la columna estaba la muestra, más cantidad de muestra problema contenía pero pura. Ya que las impurezas, las íbamos filtrando e iba quedando más pura.

Montamos un sistema para destilación y recuperar así el ácido benzoico. Una vez recuperado, lo raspamos del vaso de precipitados y medimos su masa.

Recuperamos 0.1747 g

CONCLUSIONES

CUESTIONARIO

. a) ¿Qué debe hacerse para encontrar el eluyente adecuado para un compuesto que se purificara en cromatografía en columna?

. b) La recuperación cuantitativa del producto principal de la práctica, sería más completa si se recogieran fracciones mayores o menores de 6 mL, ¿por qué?

. c) ¿Porque razón el producto se eluyó y el colorante se adsorbió en la fase estacionaria?

. d) Si se deseara recuperar el colorante adsorbido, ¿qué debería realizarse?

. e) Escriba una lista de eluyentes utilizados en cromatografía en columna en orden de 
polaridad creciente. Anote su bibliografía.

. f) Diga cual es la diferencia entre una cromatografía en capa fina y la de columna.

. g) Indique algunas de las aplicaciones de la cromatografía de adsorción.

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