Reacción de Ninhidra

Reacción de Ninhidra

Prueba utilizada para la detección de aminoácidos o proteínas, siendo así de utilidad para la separación y análisis de una muestra.

Figura 3. Reacción de ninhidra.

[pic 1]

Nota. Reacciona con dos aminoácidos que tienen un pH entre 4 y 8. Fuente: (Guarnizo & Martínez, 2018)

Coloración positiva:

Es positivo si su coloración es púrpura. Ya que la ninhidra reacciona con grupos aminos.

Coloración negativa:

Da negativo porque indica que hay una ausencia de grupos amino en la muestra, es decir; no hay aminoácidos.

Muestra 1 (Agua) Negativo Muestra 2 (Glicina)

Positivo

Muestra 3 (Alanina)

Positivo.

Muestra 4 (Ac. Asp)

Positivo.

Muestra 5 (Albumina)

Negativo

Muestra 1 (-)

Muestra 2 (+)

Muestra 3 (+)

Muestra 4 (-)

Muestra 5 (+)

Al comparar los resultados teóricos con los prácticos, analizamos que el ácido aspártico no reacciona con la ninhidra. La causa de dicho resultado puede ser por la contaminación del reactivo, ya que el ácido ocupado si contiene un grupo amino.

En cambio, la albumina reacciona y esta no debería ser así, lo que se puede deducir es que es por contaminación.  

Reacción de Biuret

Prueba que tiene la capacidad de detectar enlaces peptídicos que unen a los aminoácidos y estas reacciones con una solución de biuret.

[pic 2]

Figura 4. Complejo de cobre obtenido en la reacción de Biuret.

Nota. Reacción de una proteína en una solución de Biuret, en donde actúan los iones del complejo. Fuente: (Guarnizo & Martínez, 2018)

Coloración positiva: Al añadir Biuret en una muestra, esta cambiará de azul claro a violeta, por presencia de proteínas. 

Resultado negativo: No se observará ningún cambió de color porque no contiene proteínas o esta es muy baja.

Muestra 1 Agua (-)

Muestra 2 Glicina (-)

Muestra 3 Alanina (-) 

Muestra       4

Ác. Asp (-) Muestra 5

Albumina (+)

Muestra 1

Negativo

Muestra 2

Negativo

Muestra 3

Positivo.

Muestra 4

Negativo.

Muestra 5

Positivo.

En este caso todos los resultados son similares a los teóricos, siendo así que nos indica que en las cuatro primeras muestras al agregar biuret, no se obtiene un resultado positivo.

Reacción de Ninhidra

Las imágenes que se presentan a continuación son de cada una de las muestras en donde podemos observar los cambios de color que sufre cada una al agregar 5 gotas de ninhidra, para luego llevarlas a ebullición y observar el cambio de color que se nos presenta.

[pic 3][pic 4]

Reacción de Biuret

Las imágenes a continuación son con la reacción de Biuret, en donde se pudo observar que solo la albumina tuvo un cambio de color y las otras muestras no sufrieron ningún cambio, aunque tengan presencia de aminoácidos, la reacción de biuret causa dicho resultado.

[pic 5][pic 6]