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Sistema KOVA


Enviado por   •  15 de Julio de 2014  •  993 Palabras (4 Páginas)  •  1.826 Visitas

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Sistema Kova

Procedimiento realizado en el video:

• http://www.youtube.com/watch?v=24P-O3z4z7I

• http://www.youtube.com/watch?v=oPgA-zGpNcY

1. Homogenizamos la muestra y llenamos el tubo cónico graduado, con la orina (aprox. 12 ml método estandarizado).

2. Centrifugar por 5 min. A 1500 rpm.

3. Se introduce la pipeta para sellar el fondo cónico del tubo y se decanta el resto de orina sobrenadante.

4. El sedimento queda resuspendido en un mL de orina, homogeneizándolo con la pipeta, sin antes haberle agregado el colorante SM.

5. Se toma el sedimento con la pipeta y se llena la cámara para realizar la cuenta microscópica, esta cámara cuenta con 10 pocillos disponibles para diversas muestras.

Sistema Kova

La opción para estandarizar la cuenta microscópica como parte del examen microscópico de la orina, que en realidad fue la primera que apareció en el mercado hacia la mitad del siglo pasado, es el sistema Kova. Existen varias marcas comerciales con el mismo sistema que consta de:

• Un tubo de fondo cónico, graduado para manejar volúmenes uniformes

• Una pipeta de material flexible con un cono invertido en la parte inferior

• Cámara de cuenta con volumen conocido y cuadrícula

El proceso es el siguiente:

1. Se llena el tubo con orina homogeneizada hasta la marca superior del tubo 12 mL de orina (estandariza el volumen en la alícuota)

2. Se trabaja con la tira reactiva

3. Se tapa el tubo y pasa a la centrífuga (1500 rpm por 5 min.), donde se debe cuidar la fuerza centrífuga y el tiempo, que dependen del analista y sin los cuales el equipo puede perder su propósito.

4. Se introduce la pipeta para sellar el fondo cónico del tubo y se decanta el resto de orina sobrenadante. De esta forma el sedimento queda resuspendido en un mL de orina, homogeneizándolo con la pipeta (estandariza el volumen en el que se resuspende el sedimento y por tanto el factor de concentración de los elementos suspendidos en la orina nativa).

5. Adicionar 1 gota de reactivo Sternheimer – Malbin, que visualización de los elementos formas. Resuspender el sedimento hasta obtener una mezcla homogénea.

6. Finalmente se toma sedimento con la pipeta y se llena la cámara de cuenta para realizar la cuenta microscópica (la cuenta de partículas se informa por unidad de volumen).

7. Coloque el portaobjeto en el microscopio bajo el lente objetivo y realice la lectura a 10x y 40x.

8. Reportar los resultados como células/ uL empleando las tablas anexas incluidas en el inserto del producto.

CARACTERÍSTICAS DE LA CÁMARA

Volumen total 6,6 Ul.

Profundidad 0,1 mm.

Dimensiones 333 mm x 333 mm.

Volumen cuadro 0,9 uL

Área cuadro pequeño Dimensiones: 0, 333 mm x 0, 333 mm = 0,111

Volumen cuadrado pequeño 0,1 x 0, 011 = 0, 0111

Cálculo

Para células /uL

Factor = # elementos contados x Factor # cuadritos observados

Factor = 1 000 ul x 1 uL = 7,5

0,

...

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