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Informe de Laboratorio #3 sobre la Extracción de ADN


Enviado por   •  12 de Mayo de 2020  •  Apuntes  •  1.981 Palabras (8 Páginas)  •  94 Visitas

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UNIDAD EDUCATIVA PARTICULAR LA SALLE

Informe de Laboratorio #3 sobre la Extracción de ADN

Trabajo de Biología

ALUMNO/A: Espinoza Castro María Paula

PROFESOR: M.Sc. Josselyn Vargas 

Quito, 2019

Objetivo General

  • Por medio del uso de métodos caseros realizar la extracción de ADN, de una muestra biológica.

Objetivos Específicos

  • Demostrar la diferencia entre la extracción de ADN de manera casera y la profesional.
  • Determinar la importancia de colocar el Alcohol como último reactivo en la muestra biológica.
  • Reconocer el ADN que se ha formado después de un tiempo de reposo de la muestra.
  • Seguir de forma adecuada los pasos establecidos por el docente, con el fin de evitar que la extracción resulte fallida.

Fundamento Científico

EXTRACCIÓN CASERA

EXTRACCIÓN CIENTÍFICA

Se da uso a materiales caseros (como dice su nombre), los cuales no son complicados de conseguir.

Se da uso a materiales de uso profesional o científico, los cuales no los encontramos en un hogar común.

Por medio del ablandador de carne se lograr la separación de las proteínas que están unidas al ADN.

En cambio, aquí se da uso de proteasas, las cuales separan las proteínas que cubren el ADN, como en el proceso de degradación celular.

El experimento es posible realizarlo en un lugar poco esterilizado, tomando en cuenta que el experimento estaría en contacto con gérmenes que afecten, de cierta forma, a la muestra.

El experimento se lo debe realizar en una zona esterilizada donde los implementos utilizados no entren en contacto con gérmenes que puedan provocar efectos en la muestra.

Es necesaria moler la fruta para lograr la ruptura de las paredes celulares.

Aplicamos el proceso de Lisis Celular, que tiene como como función romper la membrana.

Se utiliza la sal para que exista un equilibrio entre las cargas positivas y negativas de la muestra, que permita la reducción de la repulsión de las hebras del ADN.

Damos uso de la RNAsa, enzima, la cual está encargada de romper las cadenas de ARN, y evita la contaminación de estas.

Colocación de agua, y posteriormente la mezcla es agitada.

Separación de lípidos, proteínas y ácidos nucleicos mediante equipos como el mezclador giratorio.

La muestra debe dejarse en reposo, con el fin de estudiarla a través de la observación o extrayendo las hebras de ADN con palillos de madera.

La RNAsa se desactiva con el calor, luego en agua ultra pura se le coloca la muestra de ADN en reposo, para pasar a la fase de cuantificación, en la cual se miden sus concentraciones por medio del espectrofotómetro.

Muestra Biológica

  • Jugo de la Fruta (Limón)

Materiales

  • Colador
  • Cuchara
  • Gotero
  • Gradilla
  • Guantes Quirúrgicos
  • Papel Absorbente
  • Tubo de Ensayo
  • Vaso de Precipitación

Reactivos

  • Ablandador de Carne
  • Agua Destilada en una Piseta
  • Alcohol
  • Detergente líquido
  • Cloruro de Sodio (Sal de mesa)

Procedimiento

Denominamos como extracción de ADN al proceso mediante el cual se obtiene ADN de la reacción entre diferentes reactivos con muestras biológicas, donde se da uso a una variedad de materiales y procedimientos dependiendo del lugar en el cual va a ser desarrollado, ya sea de manera casera o una profesional en un laboratorio científica. La forma casera, no es tan precisa como la que se realiza en un laboratorio, pero brinda buenos resultados.

Para lograr el cumplimiento de los objetivos del presente laboratorio se realizó un procedimiento de gran cuidado. En primer lugar, es necesario preparar el equipo con el que se trabajará y las muestras que serán trabajadas. Luego procedemos a seleccionar la muestra biológica con la que se va a trabajar, en este caso, la muestra biológica utilizada fue el judo del limón; como siguiente paso se exprimió el limón utilizando las manos y con ayuda del colador fue puesta una pequeña cantidad del jugo de este en el tubo de ensayo, cabe recalcar que es importante marcar el tubo de ensayo con la muestra biológica que se está trabajando, posteriormente se agregó sal a la muestra con el objetivo de cargar positiva y negativamente la muestra, ocasionando que la repulsión entre las hebras de AND disminuya, luego se le agrego detergente liquido el cual rompería la capa lipídica que compone a la membrana, después se le añadió ablandador de carne para separar las proteínas presentes en el ADN, casi para terminar se le añadió unas gotas de agua a la muestra. 

Por último, todos los materiales fueron mezclados mas no agitando al tubo, sino, golpeándolo de manera leve  contra los dos dedos de la mano, como último reactivo se añadió alcohol, el cual sería el responsable de separar el ADN de la solución acusa y que pudiera ser abrevado. Finalmente se dejó reposar la muestra y después un tiempo de esperar, se pudo observar una capa de color blanca en el tubo de ensayo, esa capa era el ADN extraído de este proceso.

  • Gráficas de la extracción de ADN:

[pic 2]

Vaso de Precipitación

Descripción: El jugo del limos después de pasar por el colador.

[pic 3][pic 4][pic 5]

Gradilla y Tubo de Ensayo

Descripción: La muestra biológica con agua destilada, sal y el Detergente Liquido.

[pic 6]

Tubo de Ensayo

Descripción: Capa Blanca la cual representa de la extracción de ADN.

Conclusiones

  • Existe la posibilidad de realizar la extracción casera de ADN, sin embargo, los resultados en comparación a un procedimiento científico profesional, son muy distintos y notablemente mejorados, pero de igual forma eficaces al momento de mostrar el ADN.
  • El rol del alcohol como último elemento en la solución, es sumamente fundamental, ya que el ADN es soluble en agua y tiende a precipitarse en un medio no acuoso (H2O), es decir en alcohol. Permitiendo que las hebras se visualicen y separen del resto de elementos permitiendo observar el ADN.
  • Se logra apreciar o reconocer de forma clara una masa blanquecina en la parte superior del tubo, lo que indica el éxito y correcta realización del experimento. Además de la clara aparición de capas residuales en el tubo.
  • La extracción de ADN  es sumamente importante para los avances científicos y el descubrimiento de nuevas enfermedades. Así también para la medicina en el diagnóstico de nuevas enfermedades y en su tratamiento, es necesario seguir los pasos de manera correcta o sino estaríamos desperdiciando una muestra biológica con potencial.

Cuestionario

  1. ¿Por qué extraemos ADN? Describa la función de este método.

El ADN es extraído, por medio de muestras biológicas (Animales, Humanas o Vegetales), con el fin de identificar el código genético de un determinado organismo, dado que, dentro de sus cadenas se encuentra la codificación y secuenciación genética que definen a un organismo. El método el cual es utilizado tiene como principal fundamento la lisis celular, proceso el cual permite romper las membranas celulares, permitiendo la liberación del ADN en la solución preparada. 

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