Inmunologia

ANTÍGENOS FEBRILES

AGENTE DE DIAGNÓSTICO

SIGNIFICADO CLÍNICO

La infección causada por microorganis-mos de diversas es-pecies produce entre otros síntomas una marcada elevaciónde la temperatura, tal es el caso de la fiebre tifoidea causa-da por

Salmonella typhi, S. enteritis

, así como lasparatifoideas causadas

por S. paratyphi

A y B,y el tifo cau-sado por el genero

Rickettsias

. La infección por estosmicroorganismos induce a una respuesta inmune de tipo hu-moral con la producción de anticuerpos que pueden ser de-tectados con el antígeno específico.Debido a la dificultad existente para el aislamiento de las

Rickettsia sp,

el antígeno empleado para la determinaciónde anticuerpos es el de

Proteus

OX-19, el cual presenta unareacción cruzada con bacterias del genero

Rickettsia

.La reacción de Huddleson es un método serológico quedetecta anticuerpos contra

B. abortus, B. melitensis

y

B.

S

uis

,

agentes causales de la

brucelosis;

también conocida comofiebre de malta o fiebre ondulante por el cuadro febril carac-terístico que se presenta.

FUNDAMENTO

La prueba se basa en una reacción inmunológica entre losanticuerpos séricos y el antígeno correspondiente produ-ciendo una reacción de aglutinación macroscópica.

CONTENIDO

qqqqq

Tífico “O” -

Salmonella typhi;

Antígeno somático,pH: 6.5

±

1.0

qqqqq

Tífico “H” -

Salmonella typhi;

Antígeno flagelar, pH:6.5

±

1.0

qqqqq

Paratífico “A” - pH: 6.5

±

1.0

qqqqq

Paratífico “B” - pH: 6.5

±

1.0

qqqqq

Proteus

OX-19 - pH: 6.5

±

1.0

qqqqq

Brucella abortus -

pH: 6.5

±

1.0

Suero control negativo:

Suero de conejo el cual no ha sido inmunizado contra nin-gún antígeno, por lo que no muestra ninguna aglutinacióncon los antígenos en suspensión.

Suero Control Positivo:

Suero de conejo el cual ha sido inmunizado contra todos losantígenos febriles en una suspensión.

MATERIALES REQUERIDOS, NO INCLUIDOS

•

Pipetas serológicas

•

Placa de Reacción

•

Agitador

RECOLECCIÓN Y PREPARACIÓN DE LA MUESTRA

Obtenga sangre venosa y separe el suero evitando lahemólisis.

MÉTODO DE PRUEBA RÁPIDA EN PLACA

Marcar en una placa de vidrio correctamente indicando elantígeno que se este usando.

NOTA:

El reactivo así como los sueros, deben alcanzar latemperatura ambiente para comenzar la prueba.1.Depositar en sitios diferentes de la placa las siguientescantidades del suero a analizar: 0.08 mL, 0.04 mL, 0.02mL, 0.01 mL y 0.005 mL (EL SUERO DEBE ESTARTOTALMENTE CLARO).2.Agitar el antígeno a utilizar para tener una suspensiónuniforme.3.Añadir 30

µ

L de la suspensión de antígeno a cada unade las diferentes cantidades de suero. Se recomiendautilizar pipetas automáticas (el gotero incluido proporcionauna gota de 30-40

µ

L).4.Mezclar el antígeno y el suero utilizando un aplicadordiferente para cada una de las cantidades de suero.5.Girar la placa manualmente o utilizando un agitadormecánico (120 rpm) durante 2 minutos.6.Realizar la lectura utilizando una fuente de luz directa yobservar la aglutinación macroscópica.7.Se recomienda incluir controles Positivo y Negativo.

INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS

El grado de aglutinación se registra como sigue:4+Aglutinación del 100% de los organismos3+Aglutinación del 75% de los organismos2+Aglutinación

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