Evolución De La Respuesta Humoral Contra Antígenos De Membrana De Merozoito De Babesia Bovis A Lo Largo Del Tiempo En Bovinos Infectados Experimentalmente
Enviado por Gustavino • 26 de Abril de 2013 • 12.070 Palabras (49 Páginas) • 398 Visitas
“Evolución de la respuesta humoral contra antígenos de membrana de merozoito de Babesia bovis a lo largo del tiempo en bovinos infectados experimentalmente”
Gustavo Daniel Asenzo
Tesis de Licenciatura en Biotecnología
Escuela de Ciencia y Tecnología
Universidad Nacional de Gral. San Martín
Marzo de 2004
Tema: “Evolución de la respuesta humoral contra antígenos de membrana de merozoito de Babesia bovis a lo largo del tiempo en bovinos infectados experimentalmente”
Alumno: Gustavo Daniel Asenzo L.U. N°: 779/97
Palabras claves: Babesia bovis, babesiosis bovina, VMSA, antígenos de la superficie del merozoito, respuesta humoral
Directora de Trabajo: Dra. Mónica Ofelia Jacobsen de Florin-Christensen
Lugar de Trabajo: Instituto de Virología perteneciente al Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas (CICVyA)
Fecha de iniciación: 12 de Abril de 2002
Fecha de finalización: 5 de marzo de 2004
Fecha de entrega: 22 de marzo de 2004
Fecha de examen: 26 de marzo de 2004
Agradecimientos
Mónica
Mariana
Rosalía
Silvina
Anabel
Susana
Ignacio
Patricia
Diego
Marisa
Instituto de Virología
Grupo de Tuberculosis
Rodolfo y Marta
Eugenia
Gabriela
Pablo
Andrés
Fernando
Hernán
Damián
Chino
Pablo
Indice
1. Resumen................................................................................................
2. Introducción...........................................................................................
2.1. Generalidades..................................................................................
2.2. Clasificación filogenética................................................................
2.3. Ciclo de vida....................................................................................
2.4. Respuesta inmune............................................................................
2.5. Signos clínicos.................................................................................
2.6. Diagnóstico......................................................................................
2.7. Tratamiento......................................................................................
2.8. Prevención.......................................................................................
2.9. Objetivo del trabajo.........................................................................
3.Materiales y métodos..............................................................................
3.1. Extracción de DNA de la cepa R1A de Babesia bovis....................
3.2. Amplificación de los genes de interés por PCR..............................
3.3. Clonado en vector de expresión y transformación de células competentes......................................................................................
3.4. Preparación de células competentes................................................
3.5. Selección de clones positivos..........................................................
3.6. Inducción de la expresión en los clones seleccionados......................
3.7. Purificación de plásmidos................................................................
3.8. Purificación de proteínas recombinantes............................................
3.9. Muestras de sueros. ........................................................................
3.10. Medición de títulos de anticuerpos por ELISA. ...........................
4. Resultados..............................................................................................
4.1. Desarrollo de test de ELISA para la determinación de títulos de anticuerpos contra distintos antígenos de B. bovis...........................
4.1.1. Preadsorción de los sueros .....................................................
4.1.2. Tiempo y temperatura de sensibilización...............................
4.1.3. Tipos de bloqueantes y tiempos de bloqueo...........................
4.1.4. Titulación de antígenos...........................................................
4.1.5. Protocolo final de ELISA.......................................................
4.2.
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