Actividad 3. Obtención Del Espectro De Absorción De La Clorofila

Actividad 3. Obtención del espectro de absorción de la clorofila

ALUMNO: JAHIL AGUSTIN GONZALEZ ESCALANTE

CARRERA: INGENIERIA TECNOLOGIA AMBIENTAL

SEMESTRE: III

MATERIA: QUÍMICA ANALÍTICA

PROFESOR: LUZ ALEJANDRA CAMPOS IBARRA

Esta actividad te permitirá graficar e interpretar datos experimentales para la obtención del espectro de absorción de la clorofila.

El espectro de absorción de la clorofila fue determinado a partir de hojas de espinaca, las cuales se trabajaron de la siguiente manera:

1. 50 gramos de hojas fueron finamente cortadas y maceradas en un mortero, hasta la obtención de una pasta.

2. Posteriormente se adicionaron 50 ml de acetona y la mezcla fue transferida a un tubo de propileno, el cual se cubrió con papel aluminio para evitar la exposición a la luz, y por ende la descomposición de la clorofila.

3. Se agitó la mezcla durante dos minutos, para extraer la mayor parte de la clorofila.

4. La mezcla fue centrifugada a 12ºC a 3000 rpm (revoluciones por minuto) durante 15 minutos.

5. El sobrenadante fue transferido a otro tubo, el cual fue cubierto y sellado rápidamente con papel aluminio, para proteger la muestra de la exposición a la luz y evitar la evaporación del disolvente.

6. La absorción de la clorofilas a, fueron determinadas en un espectrofotómetro Milton Roy Spectronic 20D.

7. El extracto fue colocado en 30 diferentes cubetas (tubos de vidrio especiales para el espectrofotómetro), las cuales fueron cubiertas y selladas con papel aluminio.

8. Las muestras fueron leídas en un rango de 400 a 700 nm, variando la longitud en 10 unidades, cambiando la cubeta en cada medida y utilizando como blanco acetona.

9. Es importante mencionar que cada vez que se variaba la longitud de onda, el aparato era calibrado a cero de absorbancia, utilizando el blanco.

10. Los valores de absorbancia obtenidos se muestran en la siguiente tabla

Tabla . Absorbancias de clorofila de espinaca a diferentes longitudes de onda

Longitud de onda (nm)

Absorbancia

400 0.72

410 0.75

420 0.85

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